药物分析实验课
期末考核报告
姓名： 罗思 班级： 09级2班 学号： 0945051114 指导老师： 钱广生 实验室： 412
2011年4月27日
紫外分光光度法测定维生素B1片含量以及方法验证
【摘要】目的：探讨维生素B1片剂中维生素B1的含量测定方法。方法：紫外分
光光度法进行含量测定，样品以标准曲线为测定含量依据，在246nm波长处测吸光度。按C12H17ClN4OS.HCl的吸收系数（
2
E11%cm）为421计算。结果：相关系数
[1]
r=0.9995,RSD=15.4%,回收率=95.1%，精密度不满足要求，结果偏高。结论：本实验失败，紫外分光光度法虽简便、准确较良好、精密度高，可作为维生素B1片含量测定方法。
【关键词】维生素B1片剂；紫外分光光度法；含量测定；方法验证
【前言】维生素B1 又称硫胺素或抗神经炎素。由嘧啶环和噻唑环结合而成的一
种B 族维生素。为白色结晶或结晶性粉末；有微弱的特臭，味苦，有引湿性，露置在空中易吸收水分。在碱性溶液中容易分解变质。pH3.5 时,可耐100℃高温，pH＞5 时易失效。遇光和热效价下降。故应置于遮光，凉处保存，不宜久贮。在酸性溶液中很稳定，在碱性溶液中不稳定，易被氧化和受热破坏。
ChP2010收载有维生素B1及其片剂和注射液[1]。ChP2010用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射液均采用紫外分光光度法。本实验采用紫外分光光度法测定片剂中维生素B1的含量，该法简便易行，高效，准确，精密度好，故可用做维生素B1片的含量测定。
[2]
【仪器与试药】
1. 实验仪器
BS210 S 电子分析天平；Unic-UV2012C 紫外可见分光光度计。
2. 药品与试剂
维生素B1片：120片/瓶.产品批号：0911141.生产日期：2009年11月14日.生产厂家：上海金宇生物科技遂平制药有限公司；对照品贮备液：0.2500mg/ml；维生素B1贮备液：5mg/ml；盐酸溶液（9→1000）。试剂均为分析纯，由实验准备室提供。
【原理】维生素B1分子中具有共轭双键结构，在紫外区有吸收，根据其最大吸收波
长处的吸光度值即可计算含量。维生素B1结构如下所示：
H3CNNH2N+SOHNCH3
【实验方法】
1．溶液的制备
1.1供试品溶液的配制
取本品20片，精密称定，研细，精密称取0.15g（约相当于维生素B1 25mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15min使维生素B1溶解，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度。摇匀，用干燥滤纸滤过。精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，即得约含维生素
B112.5ug/ml的供试品溶液。
1.2对照品溶液的配制
精密称取维生素B1对照品约25mg，置100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）溶解并稀释至刻度，制备成含维生素B1 250μg/ml的对照溶液。 2.比色皿配对
精密量取5ml1.2项下溶液，置另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，即得12.5ug/ml维生素B1对照品溶液。将对照品溶液，置于比色皿中，照分光光度法，在246nm处测定吸光度。结果记录于表1，差值在±0.005之内，说明比色皿配对。
表1 比色皿配对 器皿编号 A 1 0.000 2 0.002
3. 测定波长的选择 取2项下溶液，在波长244~248nm之间进行吸光度测定，各波长下测定两次，得均值，找出最大吸光度所在处波长即为测定波长。结果记录于表2，显示246nm为最大吸收波长。
表2 测定波长的选择 波长（nm） A1 A2 均值 244 0.503 0.503 0.503 245 0.512 0.512 0.512 246 0.516 0.516 0.516 247 0.515 0.515 0.515 248 / / / 4. 线性与范围
分别精密量取1.2项下贮备液0、3、4、5、6、7ml置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，即得系列浓度的对照品溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，数据记录于表3，以吸收度（A）对浓度（C）回归处理，得标准曲线和回归方程为y=0.041x + 0.074，r2=0.9995，见图1。浓度范围为4.7ug/m~16.9ug/ml。
表3 标准曲线的绘制
编号 浓度（ug/ml） 吸收度 1 7.5 0.314 2 10 0.421 3 12.5 0.514 4 15 0.623 5 17.5 0.725 标准曲线0.80.70.60.50.40.30.20.100510对照品浓度（ug/ml）15y = 0.041x + 0.00742R = 0.9995吸光度系列1标准曲线20
5.准确度实验（回收）
对照品溶液的制备：对照品溶液的制备，同1.2项下。
供试品溶液的制备：精密称取维生素B1精制原料约0.25g，置50ml量瓶中，加入盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，制成5.0mg/ml维生素B1溶液储备液；分别精密量取该溶液0、4、5、6ml置已加入比例量辅料（0.15g，1/100天平）的100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇使之溶解，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，得高、中、低三种浓度的试验溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，每试测定三次，共得9个数据，分别用对照品比较法计算含量。结果见表4，准确度较好。
表4 准确度实验 吸收度 （A） 加入浓度 （ug/ml） 测定浓度 （ug/ml） 回收率 （%） 均值 （%） RSD （%） 低 1 2 3 10 10 10 12.5 12.5 9.41 9.43 9.41 12.0 11.9 94.1 94.3 94.1 96 95.2 中 4 5 95.1 0．30 6 高 7 8 9 12.5 15 15 15 12.0 14.4 14.3 14.3
96 96 95.3 95.3 5. 精密度实验及含量测定
取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），一式5份，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）适量，振摇15min，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，即得约含维生素B112.5mg/ml的供试品溶液。
另取维生素B1对照品溶液，用盐酸溶液（9→1000）稀释制成12.5μg/ml的对照品溶液。照分光光度法（ChP2005二部附录IVA）在246nm处分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度，每试液测定两次，用百分吸光度和对照品比较法分别进行计算，即得。结果见表5、6，说明精确度良好，且可算出供试品中维生素B1应为标示量的。
表5 精密度实验及含量测定（百分吸光度法） 编号 重量（g） 1 1 0.19 2 1 2 0.1966 2 1 3 0.1678 2 1 4 0.1787 2 1 5 0.1736 2 1 2 A 0.663 0.6 0.743 0.744 0.565 0.567 0.543 0.544 0.786 0.786 0.508 0.508 标示量（%） 118.47 118.65 118.56 128.31 128.48 128.4 114.32 114.72 114.52 103.17 103.36 103.26 153.72 153.72 153.72 / / 123.69 15.4 均值 RSD（%） 均 0.6 均 0.744 均 0.566 均 0.544 均 0.786 对照 / 均 0.508 / 表6精密度实验及含量测定（对照品比较法）
编号 重量（g） 1 1 0.19 2 1 2 0.1966 2 1 3 0.1678 2 1 4 0.1787 2 1 5 0.1736 2 1 对照 2 A 0.663 0.6 0.743 0.744 0.565 0.567 0.543 0.544 0.786 0.786 0.508 0.508 标示量（%） 114.37 114.54 114.45 123.86 124.03 123.95 110.35 110.75 110.55 99.59 99.77 99.68 148.39 148.39 148.39 / / / 119.4 15.4 均值 RSD（%） 均 0.6 均 0.744 均 0.566 均 0.544 均 0.786 均 0.508
注：20片总重为1.3797g，平均片重为0.069g，取样范围为0.1553~0.18g。
【结果】
由表5、表6知，本实验做出来的结果不在90.0%-110.0%之内，值偏高，不合格。本实验失败。
【讨论】
1. 实验结果与初始称样量有关。取值范围为0.1553-0.18g，而取样中有0.1900g以及
0.1966g，偏差较大，使结果偏差较大，精密度差。
2. 可能称量瓶过湿，影响称量。样品5，称量时电子分析天平可能出错，实际称重量应该
比记录值高。导致样品5值偏高很多。
3. 容量瓶重复利用时，可能未洗净，导致药品残留，浓度偏高。
4. 实验分两次进行，未遵守平行原则。测量时所用比色皿不同，紫外分光光度计不同，仪
器可能出现系统误差，使精密度数据高于回收率实验数据。
【参考文献】
[1].2010年版《中国药典》；杭太俊.药物分析（第7版）.人民卫生出版社
[2].解红梅.张丽丽.差示分光光度法测定维生素B1的含量.黑龙江省伊春市药品检验所（153000）
3. .吴勇.成丽.现代药学实验教程.四川大学出版社
