维普资讯 http://www.cqvip.com ＨＥＩＬＯＮＧＪＩＡＮＧ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＰＨＡＲＭＡＣＹ Ａｕｇ．２００８，Ｖｏ１．３１ Ｎｏ．４ ・６１・ 银杏叶提取物对实验性２型糖尿病大鼠肾脏的保护作用 张婷 ，李善昌 ，梁衍锋 ，王芳芳 （１．佳木斯大学基础医学院病生教研室，黑龙江佳木斯１５４００７；２．佳木斯大学第二附属医院颌面外科，黑龙江佳木斯１５４００３） 摘要：目的：探讨银杏叶提取物（ＥＧＢ）对早期糖尿病肾病的影响。方法：选３～４月龄雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，随机分为糖尿病组、 银杏叶组和正常对照组。应用链脲佐茵素（ＳＴＺ）制备大鼠糖尿病模型。银杏叶组腹腔注射银杏叶提取物注射液，用药１ｏ周后， 测定肾组织匀浆丙二醛、一氧化氮、超氧化物歧化酶、一氧化氮舍酶的活性。结果：与糖尿病组相比．银杏叶组大鼠肾组织内 ＳＯＤ活性明显升高，ＮＯＳ活性、ＮＯ含量明显下降；糖尿病肾组织光镜及透射电镜观察到肾脏出现明显的病理改变；银杏叶组 大鼠肾脏病理改变较轻。结论：银杏叶总黄酮可改善血管内皮细胞源性ＮＯ合成和释放，能有效清除体内自由基和提高抗氧化 能力。 关键词：银杏叶提取物；糖尿病；肾脏 中图分类号：Ｒ５８７．１文献标识码：Ａ文章编号：１００８－ ０１０４（２００８）０４—００６１—０１ 糖尿病肾病（ＤＮ）是糖尿病（ＤＭ）的严重并发症之一，几 ｌｍｏｌ／Ｌ作为分离介质，制成线粒体悬液，一２Ｏ＇（２保存待测。 乎所有患者都随着病情发展而出现不同程度的微血管病变， １．３葡萄糖耐量试验 继而发生肾脏的损害。银杏叶提取物是一种作用广泛的天然 药物，其有效成分主要为银杏黄酮苷类和萜烯内酯类，具有 大鼠禁食６ｈ后．腹腔注射１．１ｌｍｏｌ／Ｌ葡萄糖溶液２ｇ／ｋｇ， 清除自由基，保护神经，拮抗血小板活化因子，改善血流状态 内眦取静脉血测定０、０．５、１、２ｈ血清葡萄糖水平。 等作用。文献表明，ＤＭ时高血糖，自由基，多种细胞因子均 １．４组织样品处理 参与ＤＮ的发生发展。本实验拟检测ＤＭ模型动物一氧化氮 取左肾皮质，切成３ｍｍ薄片后用１Ｏ 中性固 （ＮＯ）含量、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及其相关介质超氧化 物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）水平的改变，观察ＥＧＢ防治 定，常规脱水石蜡包埋，制作切片，切片厚５ ｍ，ＨＥ染色，光 ＤＮ的作用和机制。 镜观察；另取左肾小块组织，经２．５ 戊二醛，锇酸双固定，酒 精、丙酮梯度脱水．环氧树脂８１２包埋，最后制成５ＯＯ～７００埃 １材料与方法 的超薄切片，透射电镜观察。 １．１动物模型的建立、分组及处理 １．５各项指标检测 ３～４月龄雄性Ｗｌｓｔａｒ大鼠５Ｏ只，随机分为糖尿病组、银 血清葡萄糖浓度测定按葡萄糖氧化酶法，丙二醛 杏叶组和正常对照组。大鼠禁食１６～１８ｈ，自由饮水，模型组 （ＭＤＡ）含量用硫代巴比妥酸法，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性 和银杏叶组经尾静脉注射２ 链脲佐菌素（２５ｍｇ／ｋｇ），对照 用黄嘌呤氧化酶法，一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性用化学比色 组经尾静脉注射等量生理盐水；正常饮食喂养２周后，进行糖 法测定，Ｎ０含量用还原酶法测定ＮＯ。一／ＹＯ。一含量为代 耐量实验，模型组和银杏叶组以糖耐量异常者保留。模型组 表，肾组织匀浆蛋白含量按考马司亮蓝法测定，试剂盒均购 和银杏叶组改喂高脂高糖饮食，银杏叶组另外腹腔注射银杏 自南京建成生物工程研究所。 叶提取物注射液（８ｍｇ／ｋｇ・ｄ北京双鹤高科天然药物有限公 １．６统计学处理 司购买）持续１Ｏ周，动物均单独喂养，实验结束前１天做糖耐 量试验。实验结束后断头抗凝取血，光镜和透射电镜观察组 试验数据各项指标测定结果用均数士标准差（ 士ｓ）。 织病理学改变。 数据采用ｆ检验，组问比较采用方差分析，ＳＰＳＳ１１５１软件完 １．２组织匀浆的制备及线粒体的提取 成。 ２结果 取肾组织，用０．９ 冷生理盐水按重量体积比１：４配成 ２Ｏ 组织匀浆，然后１０００ ２０００ｒ／ｍｉｎ，离心１０ｍｌｎ，保留上清 ２．１ ２型糖尿病模型制备 液，一２Ｏ℃保存待测。另取肾组织称重，加入０．１ｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ— 实验开始及实验１Ｏ周时，糖尿病组大鼠均出现糖耐量异 ＨＣ１（ｐＨ７．４），ＫＣＬｌｍｏｌ／Ｌ，０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖（均用去离子水 常的变化（Ｐ＜０．０５），ｌｈ血糖增高显著（Ｐ＜０．０５）达到高 配置）。匀浆后，制成１Ｏ 匀浆，低温离心（８００ｒ／ｍｉｎ）１５ｍｉｎ， 峰，２ｈ血糖仍较高；对照组大鼠３０ｍｉｎ血糖达到峰值，２ｈ基 除去细胞碎片、细胞核等，取上清低温离心（１８０００ ｒ／ｍｌｎ） 本恢复正常。见表１～２。 １５ｍｉｎ，弃上清，加入０．１ｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ（ｐＨ７．４），ＫＣｌ 表１ 实验开始葡萄糖耐量（ 士ｓ，ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ一８） 。Ｐ＜０．０５ ＶＳ对照组； Ｐ＜０．０５ ｖｓ模型组。 ２．２ 肾脏组织光镜及电镜观察结果 鼠肾脏病理改变较轻。电镜下，与对照组大鼠相比，糖尿病组 饲养１Ｏ周后，与正常对照组大鼠相比，模型组大鼠光镜 大鼠肾皮质可见肾小球基底膜弥漫性均匀增厚，系膜区电子 下观察到肾脏病理结构已出现：肾皮质变薄，肾小球缩小，数 致密物沉积，系膜区基质明显增多等超微结构的变化，而银 量减少，肾小球基底膜增厚，肾内毛细血管管壁增厚、玻璃样 杏叶组大鼠肾皮质中上述超微结构病变较轻。 变，管腔狭窄，肾小管上皮细胞出现空泡样改变；银杏叶组大 表３ 肾组织匀浆ＮＯ、ＮＯＳ、ＭＤＡ、ＳＯＤ含量的变化（ 士ｓ，ｎ＝８） 。Ｐ＜０．０５ ｖｓ对照组； Ｐ＜０．０５ ｖｓ模型组。 ６２页） 维普资讯 http://www.cqvip.com ・６２・ 黑龙江医药科学２００８年８月第３１卷第４期 刺血走罐治疗肩背肌筋膜炎４０例疗效观察 霍明霞 ，刘铁民 （１．佳木斯大学附属第一医院，黑龙江佳木斯１５４００３；２．佳木斯中医院，黑龙江佳木斯１５４００２） 关键词：肩背肌筋膜炎；刺血走耀疗法 中图分类号：Ｒ２４４．３文献标识码：Ｂ文章编号：１００８一Ｏ１０４（２００８）０４～００６２—０１ 肩背肌筋膜炎又称肩背纤维织炎或肌肉风湿症，一般是 指筋膜、肌肉、肌腱和韧带等软组织的无菌性炎症．引起肩背 部疼痛、僵硬、运动受限及软弱无力等症状。常累及斜方肌、 菱形肌和提肩胛肌等。笔者运用刺血走罐治疗肩背筋膜炎， 效果满意，报道如下。 １ 临床资料 １．１ 一般资料 选取２００３￣２００７年本科收治肩背肌筋膜炎患者７３例，分 为刺血走罐组４Ｏ例，男１８例，女２２例．年龄１８～６０岁，病程５天 ２年；对照推拿组３３例，男９例，女２４例。年龄２２～５６岁。病程 １个月～３年。患者表现：肩背部酸痛不适，肌肉僵硬板滞．或 有重压感，向一侧或两侧背部与肩胛之间放射。晨起或天气 变化、受凉或劳累后症状加重，肩背部活动受限，背部有固定 ～部固定压痛点或痛性结节处，粗针快速刺入３～ｓｒｄ－，放出少 许血后，迅速加拔火罐，每罐放血２～１０ｍＬ，令其自然止血， 起罐后局部消毒。刺血走罐隔２日１次，７次为一疗程。 １．２．２推拿疗法 ①松解手法：患者坐位，医者站于患者背后，先用一指禅 推法推颈项督脉及膀胱经３～５遍，再拿揉肩颈部肌筋２～ ３ｍｉｎ，并配合肩背颈项屈伸及旋转运动。②解痉止痛法：用拇 指点压、按揉风府、风池、肩井、风门、肺俞、心俞等穴及痛点， 以酸胀感为度。然后施拇指弹拨手法于肌痉挛处或痛点３～５ 次。⑧整理手法：滚揉斜方肌和菱形肌３～５遍，然后拿揉斜方 肌，提拿肩井２～３ｍｉｉ Ｌ，最后用小鱼际或空拳拳眼轻叩击项背 部，直擦督脉和膀胱经，结束治疗。推拿每天１次，１Ｏ次为一疗 程。 压痛点或痛性结节。有反复发作病史，Ｘ线检查排除颈椎病。 １．２治疗方法 １．２．１刺血走罐疗法 １．３治疗结果 先在患者肩背广泛涂抹红花油（部分红花油过敏者．可 选用按摩乳），闪火法将罐吸拔在皮肤上，用右手握住罐子， 沿肩背督脉及膀胱经上下往返，推移至所拔皮肤潮红。选背 表１ 两组患者的疗效和疗程比较（ｎ／ ） 疗效标准：临床治愈：肩背疼痛消失，活动自如，无复发； 好转：肩背部疼痛减轻，活动时稍有不适；未愈：症状无改善。 治疗结果：经过１～３个疗程治疗，两组比较有效率分别 为９２．５％和７２．７％，刺血走罐组优于推拿对照组，疗程比较 两组亦有明显差别，见表ｌ。 ２讨论 ①肩背肌筋膜炎又称纤维织炎、肌纤维炎，是较常见的 慢性软组织疾病。其病因多由于长期低头、伏案工作等慢性 劳损使肌肉长时间过度紧张、痉挛，虽损伤轻微，病变部位 小，但在肌肉筋膜组织中产生变性、肥厚，形成纤维小结而引 起较广泛的疼痛。②本病属中国传统医学中的“痹证”。多因 劳损、外邪侵犯而致脉络、经筋受损，气血运行壅滞、淤血内 积．闭塞不通。走罐以红花油为介质，能松弛肌肉，解除紧张， 促进局部血液循环。对固定压痛点或痛性结节采取刺血加拔 火罐可疏通经络中壅滞的气血，去其宛陈，行气血加强通络 止痛的效果，较单纯的推拿治疗疗效好，疗程短。此法损伤 小，出血量和针刺深度、力度易于掌握。⑨治疗本证前应排除 颈椎病，平时应注意预防复发，加强肩背部功能锻炼，积极参 加体育活动，如体操、打太极拳等，增强肩背部的肌力和身体 素质。不要长时间低头伏案工作，尤其在室内开冷气时，注意 防寒保暖。手法是治疗的重要手段，控制好手法的幅度和力 度，力求平稳、轻巧，使患者在治疗过程舒服，无痛苦。 （收稿日期：２００８一Ｏ３—０２） 作者简介：霍明霞（１ ９６９～）女，黑龙江佳木斯人，副主任医师．学士。 （上接第６１页） 肾组织匀浆Ｎ０含量、Ｎ０Ｓ活性变化，模型组明显升高 （Ｐ＜０．０５），而银杏叶组与对照组比较差异无显著性（见表 ３）。 肾组织匀浆ＭＤＡ含量变化．模型组明显升高 （Ｐ＜０．０５）．而银杏叶组与对照组比较差异无显著性；肾组 织匀浆Ｓ０Ｄ活力变化，模型组明显降低（Ｐ＜０．０５）。而银杏 叶组与对照组比较差异无显著性，见表３。 ３讨论 亡＿Ｌ２］。研究发现，ＳＴｚ诱发的糖尿病大鼠早期肾脏组织中 Ｎ０Ｓ活性明显增加，ＮＯ浓度也升高，同时发现该组大鼠肾 脏组织超微结构发生改变，并随着时间延长和病变的进展以 及Ｎ０、Ｎ０Ｓ逐步升高．超微结构的改变也逐步加重，这提示 Ｎ０Ｓ的异常激活与Ｎ０的过度升高参与了糖尿病肾脏病变 的形成。而银杏叶组大鼠Ｎ０含量、Ｎ０Ｓ活力明显低于模型 组，说明银杏叶总黄酮可改善血管内皮细胞源性ＮＯ合成， 与此同时，糖尿病大鼠肾组织中的ＳＯＤ活性明显下降，ＭＤＡ 含量升高，这提示糖尿病大鼠肾脏组织中脂质过氧化反应增 强，抗自由基损伤的作用减弱。 参考文献： ［１］王彤，周国用，汤秀群，等．ＳＴＺ和高脂肪饲料诱导实验性２型糖尿 病大鼠模型ＥＪ］．中国糖尿病杂志，２０００，８（２）：１ｌ卜ｌ１２ ［２］徐一甄，方京冲．一氧化氮与糖尿病大鼠心脏病变的关系［Ｊ］．复 旦学报（医学科学报），２００１，２８（５）：４４１—４４２ （收稿Ｂ期：２００８—０５—０３） 在实验中选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠建立糖尿病模型．先通过尾静 脉注射链脲佐菌索造成糖耐量异常，再喂以高糖高脂饮食诱 发动物肥胖，持续喂养１ｏＮ后检测到动物体重增加，葡萄糖 耐量异常，这与人的２型糖尿病病理改变类似，此方法与实验 性糖尿病动物模型建立的相关研究一致＿Ｌ１］。Ｎ０是细胞问和 细胞内信号转导分子．可以介导多种细胞因子的病理作用， 也参与许多自身免疫性疾病的发生；高水平的ＮＯ可损伤线 粒体、含铁硫蛋白酶．甚至引起ＤＮＡ的损伤，造成细胞死 作者简介：张婷（１９７２～）女．黑龙江佳木斯人，副教授，硕士。
