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GMP文件 Countstar细胞计数仪操作规程

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细胞计数仪操作规程

1、Countstar细胞计数仪简介

1.1 基于经典台盼蓝染色法原理开发。

1.2 采自动优化成像系统,无需人工调焦,摒除人工调焦的误差。

1.3 精确标定死活细胞和校正结团细胞,能快速进行细胞计数、细胞形态和细胞统计图分析。

1.4 样本需求量低,快速:20µl/样本,<20s/样本。

1.5 自动光学对焦、成像并进行数据分析,每个样本可进行多个视野检测,系统自动统计出平均结果。

1.6 测量浓度范围:1×104~3×107/ml。

1.7 直径范围:5-180µm大小的各种原代细胞及传代细胞、干细胞、肿瘤

细胞、血细胞、昆虫细胞、藻类及部分浮游动物。

2、 操作过程简介

2.1 打开配套电脑,进入Windows操作系统;

2.2 双击桌面上的Countstar图标,进入Countstar控制中心;

2.3 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮表示仪器已打开;

2.4 设定所测的细胞参数;

2.5 取样。当样品浓度过大时,用盐水或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;

2.6 染色。使用0.2%台盼蓝染色(一般为10μl、1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;将细胞悬液充分混匀;

2.7 加样。移液取细胞悬液加入样品板,每槽20μl;

2.8 插入计数板;

2.9 自动计数结果;

2.10 根据测试结果可适当调整细胞参数以达到最佳测试结果;微调旋钮同一样本可进行多个视野检测,系统自动统计出平均结果。

3、检测结果包括

2.1 细胞图片

2.2 总细胞浓度

2.3 活细胞浓度

2.4 死细胞浓度

2.5 细胞存活率

2.6 细胞平均直径

2.7 细胞增长曲线

2.8 细胞大小柱状图

2.9 细胞平均圆度

2.10 细胞结团率

2.11 细胞结团柱状图(具体操作参见说明书)

4、细胞总浓度的检测

4.1无台盼蓝染色时,Countstar细胞计数仪可以检测细胞浓度、细

胞平均直径、细胞平均圆度和细胞聚团率(绿色圈所示为有效计数细胞)。

4.2 Countstar细胞计数仪可以通过台盼蓝染色检测活细胞浓度、死细胞

浓度和细胞存活率(绿色圈计数为活细胞,黄色圈计数为死细胞)。

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