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茶多酚检测试剂盒(酒石酸铁比色法)

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北京雷根生物技术有限公司 www.leagene.com

茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)

简介:

茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等,是一类儿茶素为主体的黄酮化合物,儿茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架结构,是一种重要的天然抗氧化物质,能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁

Leagene 茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)检测原理是以酒石酸铁为底物,利用茶多酚与酒石酸铁反应,生成稳定化合物,以分光光度计540nm处测定吸光度,在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比,与标准曲线比较,进而计算茶多酚含量。该试剂盒主要用于测定植物组织、血清等样品中茶多酚含量,尤其适用于测定茶叶中茶多酚含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:

自备材料:

1、 蒸馏水 2、 研钵 3、 离心管或试管 4、 离心机 5、 比色杯 6、 分光光度计

编号 TO1203 名称 50T 1ml 500ml 25ml Storage 试剂(A): 茶多酚标准(1mg/ml) 试剂(B): TP Assay buffer 试剂(C): TP显色液 使用说明书 4℃ 避光 4℃ 4℃ 避光 1份 操作步骤(仅供参考):

1、 配制茶多酚标准:取干净离心管或试管和茶多酚标准(1mg/ml),按下表进行操作,依

次稀释。

加入物(ml) 茶多酚标准(1mg/ml) TP Assay buffer 1 0.01 0.49 2 0.02 0.48 3 0.03 0.47 4 0.04 0.46 5 0.05 0.45 北京雷根生物技术有限公司 www.leagene.com

相当于茶多酚含量(μg/ml) 20 40 60 80 100 2、 准备样品:

①植物样品:取植物组织,研磨成粉末。煮沸 TP Assay buffer,将0.2g粉末完全加入TP Assay buffer中,沸水浴,用200目细胞筛或滤纸过滤。滤渣再继续置于新的煮沸4.5ml TP Assay buffer中,沸水浴,用200目细胞筛或滤纸过滤,合并两次滤液。5000g离心,取上清液,即为茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的检测。

②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,4℃避光保存,用于茶多酚的检测。

③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要用TP Assay buffer进行适当匀浆,5000g离心15min,取上清液,即为茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的检测。

④高浓度样品:如果样品中含有较浓度的茶多酚,可以使用TP Assay buffer进行恰当的稀释。

3、 TP加样:按照下表设置空白管、对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意

避免产生气泡。如果样品中的TP浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置2平行管,求平均值。

加入物(ml) TP Assay buffer 系列茶多酚标准(1-5号) 待测样品 TP显色液 空白管 2 - - 0.5 标准管 1.5 0.5 - 0.5 测定管 1.5 - 0.5 0.5 4、 TP测定:比色杯光径1.0cm,以空白调零,以分光光度计测定540nm处标准管、测

定管的吸光度。

计算:

以系列茶多酚标准浓度(1-5号)(20、40、60、80、100μg/ml)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得提取液中TP含量。

组织样本TP含量(μg/g)= (C×VT)/(W×VS)

液体样本TP含量(μg/ml)= (C×VT)/ VS

VS=测定时所用提取液的体积(ml)

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注意事项:

1、提取茶多酚时,注意提前煮沸TP Assay buffer,以便充分提取。 2、如果没有分光光度计,也可以使用普通的酶标仪测定。

3、每次检测指标不宜过多,否则操作时间不一,有可能导致样本间的差异。

有效期:6个月有效。 相关:

编号 CC0007 CM0004 DC0032 DF0135 NR0001 PS0013 TC0733 TC1167 LB培养基 Masson三色染色液 多聚甲醛溶液(4% PFA) DEPC处理水(0.1%) RIPA裂解液(强) 乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法) 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法) 名称 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)

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