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(1)对于一般的抗生素测定来说 ,大多数情况下都需要把牛津杯加满 ,但作者在实际测定中发现 ,若加满牛津杯 ,培养 24 h后牛津杯内仍有将近一半的残留溶液。
(2)管碟法测定 Nisin 效价时 ,控制检测平板中菌悬液的浓度非常重要 ,过浓则抑菌作用不明显 ,过低则菌体生长稀疏 ,抑菌圈不明显或者不规则 ,难以准确测量
(3)过高的琼脂质量浓度(2 g/ dL 以上)冷却至 50 ℃以下倒平板时 ,很快就会凝固 ,不便于制备菌层;而琼脂质量浓度太低时(低于 1 g/ dL) ,培养基不容易凝固 , ,产生的抑菌圈亦不太规则.
(4) 抗菌肽在牛津杯中的球形扩散过程中 上层培养基越薄,越有利于抗菌肽的横向扩散 ,以及培养基越薄 指示菌数相对更少一些 故而抑菌圈大。
（5）加注的培养基如果温度太低，就容易结块不能均匀铺开，应为60-80oC.加注培养基底层之后，不应该立即给双碟加盖，以避免形成水蒸气。
（6）可以事先把配制好的培养基分装在具塞试管内，每管5mL，湿热灭菌后放在50
oC
水浴锅内保温。试验中，再分别加入菌液混匀，配制成带菌琼脂，继续保温5min使培
养基温度回升，倒在底层培养基上，迅速转动双碟使培养基均匀铺开。
（7） 放置小钢管时，注意管与管之间、管与双碟边缘不能太靠近。
（8）滴加时离钢管口距离不要太高，一旦滴管中出现气泡或者残留，就重新吸取抗生素溶液进行滴加，滴管口应避免太细。滴加时若有溅出，可用滤纸片轻轻吸去。滴加后，液面应与小钢管口齐平，液面反光显黑色。
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（8） 双碟放入培养箱内，要与箱壁保持一定的距离，双碟叠放不能超过3个。
（10）测量抑菌圈直径时，不易取去小钢管或把双碟翻转过来测量抑菌圈直径。
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