改良机能实验“尿生成影响因素”的尝试

Ｖ０１．２６　２０ｏ８　Ｎｏ．１１　＂的尝试　改良机能实验“尿生成影响因素　李海涛，王俊亚，张东梅　（首都医科大学燕京医学院，北京１０１３００）　关键词：机能实验；教学改革；影响因素　中图分类号：Ｇ４２４．３１　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７１—１２４６（２００８）１　１－０１　１０－０１　随着医学教育教学改革的不断深入，提高学生的综合能力　和实践水平成为医学高职院校的主要培养目标。为此，我院加　大了实验教学时间和精力投入，将生理实验“尿生成影响因素”　与病理生理学和药理学内容整合为综合性强的机能实验，但因　实验难度大、成功率低，所以对其进行了改进。　１手术方法的改进　实验动物为大耳白兔。实验基本手术操作包括：麻醉与固　定；分离气管，行气管插管；分离左侧颈总动脉，行动脉插管；暴　露膀胱，行膀胱插管。观察呼吸、血压和尿量变化。　（１）２Ｏ％氨基甲酸乙酯麻醉，按５ｍｌ／ｋｇ剂量从耳缘静脉注　射。本实验要从耳缘静脉注射大量生理盐水和药物，故耳缘静　脉保护特别重要。麻醉针刺从远心端到近心端。麻醉固定后，耳　缘静脉滞留输液针。输液针软管充满肝素生理盐水，避免血栓　形成。钳夹封闭输液针软管，避免血液回流。　（２）根据动物状态采取不同手术方案。动物体质虚弱、体重　小于２ｋｇ，或动物一直为饥饿状态，无须麻醉，束缚固定。无缺　氧，不做颈部手术。若是雄兔，可选用１２号导尿管，导尿管头端　用石蜡油润滑，从外尿道插入膀胱，引流尿液，用计滴器计量尿　液。耳缘静脉给药，观察部分因素对肾脏泌尿功能的影响。　动物体质较强、体重大于２ｋｇ，动物饱腹，可麻醉，行气管插　管、动脉插管，行膀胱插管或输尿管插管引流尿液。　尿液引流通常有以下几种术式。　经外尿道膀胱插管法：适用于幼小和体质虚弱的雄性动物。　此类动物出现麻醉意外几率高，手术成功率低，即使手术成功，　体液大量蒸发或出现严重水电解质平衡紊乱，动物可能出现无　尿，后续实验无法进行，实验失败。　膀胱造瘘插管：在膀胱壁无血管处剪ｌ￣２ｅｍ小口，将膀胱　插管插入膀胱，避开输尿管结扎即可。手术方法简单，较常用，　但实验结果受膀胱内压和膀胱肌肉收缩的影响，不能准确反映　肾脏泌尿情况，不能观察一侧肾脏的泌尿功能，只能观察两肾　总的泌尿功能。　膀胱外的输尿管插管法：在输尿管上剪一斜切Ｅｌ，将插管　插入输尿管并结扎固定。此法易损伤输尿管，产生出血，有时甚　一ｌ】０一　至出现凝血块堵塞现象。另外，输尿管切口难于掌握，家兔的输　尿管管壁薄、口径小，若切口小，则插管不易插入管腔中，且易　插至管壁内层，不能导尿；若切口大，则插管时又易将输尿管插　断而影响导尿。学生实验即使用大动物，成功率仍不高。　膀胱切开输尿管插管法：将膀胱移出体外，仔细辨认膀胱　三角输尿管位置，在膀胱中间作一纵行切口（应避开血管），将膀　胱底内壁外翻，寻找一对乳头状突起的输尿管口，用充满肝素　生理盐水的细塑料管分别从两侧输尿管口顺着输尿管的方向　缓缓插入，此时可见尿液从插管内流出，用线在输尿管近膀胱　处结扎固定。此法可避免膀胱本身因素的影响，既可观察肾脏　总的泌尿情况，也可观察单个肾脏的泌尿情况，还可同时进行　两肾泌尿量的比较。　２实验内容的改进　整合后“尿生成影响因素”包括生理因素影响和肾功能衰　竭后的泌尿功能改变。生理因素影响包括：描记正常血压、呼吸　和尿量曲线一耳缘静脉注射３７ｏｃ生理盐水２Ｏｒｎｌ一静脉注入垂　体后叶素２ｕ一用尿糖试纸定性测量尿糖，静脉注射２０％葡萄糖　５ｍｌ，待尿量明显增多后，再用尿糖试纸定性测量尿糖一刺激右　侧迷走神经外周端一静脉注射１：１０　０００去甲肾上腺素Ｏ．５ｒｎｌ一　静脉注射呋塞米（５ｍｇ／ｋｇ），观察并记录血压和尿量变化。实验　时最易出现的问题是动物肾脏不分泌尿液。其原因复杂，可能　是动物体质虚弱、饥饿、手术应激、体液大量蒸发等造成的。因　此，实验前应给予动物高水分的食物；实验过程中，动物保温，　尽量减少体液蒸发；补足体液，交替使用利尿剂和抗利尿剂，实　验效果更加明显。此外，手术过程可能出现弥散性血管内凝血，　即使已经使用肝素，耳缘静脉也可能出现血栓，需建立股静脉　和颈前静脉输液途径。　３急性缺血性肾功能衰竭探索　监测肾缺血前后血浆尿素氮和尿蛋白的变化，判断肾脏缺　血损伤程度。在上述实验结束约３０ｍｉｎ后，结扎并剪断右肾蒂，　摘除右肾。将覆有温热生理盐水纱布的腹腔内容翻向右侧，在　左后腹壁找到左肾和左肾蒂，分离左肾动脉约ｌｅｍ，安置一动　脉夹，阻断肾脏血液供应６０ｍｉｎ。急性缺血性肾功能衰竭模型制　备关键在于夹闭左肾动脉前给肾脏预适应过程（先夹闭１０ｍｉｎ，　松开，恢复肾脏血液供给），再夹闭６０ｍｉｎ。松开可收集肾功能衰　竭后的尿液，检测尿蛋白变化。Ａ