诊状 可能的原因 1.柱温变化 2.等度梯度间未能充分衡 柱恒温 解 方 法 少用10倍柱体积的流动相(一) 3.缓液容够 保留时间变化 4.柱染 5.柱内条件变化 6.柱快达到寿命 1.流增加 2.样品超载 (二) 3.键合相流失 保留时间缩短 4.流动相组成变化 5.温度增加 1.流降 () 2.硅胶柱活性点变化 保留时间延长 3.键合相流失 4.流动相组成变化 5.温度降低 1.样品体积过大 (四) 2.样品溶剂过强 3.柱塌陷或形成短路通道 4.柱内烧结锈钢失效 5.进样器损坏 1.进样阀残余峰 2.样品中未知物 (五) 3.柱未衡 鬼峰 4.氟乙酸(TF致)氧化(肽谱) 5.水染(反相) (六) 1.气泡(尖锐峰) 衡柱 用>25造造o速/L的缓液 洗柱 稳定进样条件,调节流动相 采用保护柱 检查泵,重新设定流 降低样品 流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向 防止流动相蒸发或沉淀 柱恒温 管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡 用流动相改性剂,如加乙胺,或采用碱钝化柱 同前(二)3 同前(二)4 同前(二)5 用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15% 采用较弱的样品溶剂 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件 更换烧结锈钢,加在线过滤器,过滤样品 更换进样器转子 次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗 处理样品 重新衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱) 新配,用抗氧化剂 通过变化衡时间检查水质，用HPLC级的水 流动相脱气,加柱后背压 出现肩峰或分叉 2.染(随机噪声) 基线噪声 3.检测器灯连续噪声 4.电扰(偶然噪声) 5.检测器中有气泡 1.柱超载 2.峰扰 3.硅羟基作用 (七) 4.同前(四)4 峰拖 5.同前(四)3 6.死体积或柱外体积过大 7.柱效降 1.进样体积过大 2.在进样阀中成峰扩展 3.数据系统采样率慢 4.检测器时间常数过大 (八) 5.流动相粘度过高 峰展宽 6.检测体积过大 7.保留时间过长 8.柱外体积过大 9.样品过载 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂 更换氘灯 采用稳压电源,检查扰的来源(如水浴等) 流动相脱气,加柱后背压 降低样品,增加柱直径采用较高容的固定相 清洁样品,调整流动相 加乙胺,用碱钝化柱增加缓液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品 同前(四)4 5.同前(四)3 连接点降最低,对所有连接点作合适调整,可能采用细内径的连接管 用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱 同(四)1 进样前后排出气泡以降低扩散 设定率应是峰大于10点 设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10% 增加柱温,采用低粘度流动相 用小体积,卸热交换器 等度洗脱时增加溶剂含也可用梯度洗脱 将连接管径和连接管长度降最小 进小浓度小体积样品
