药学研究・『０ｕｍａｌ Ｄ厂Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０１３ Ｖｏ１．３２ ｌ４ 不同厂家复方黄连素片的溶出曲线研究 郭东晓 ，林永强 ，刘金花 ，林林 ，汪冰 （１．山东省食品药品检验所，山东济南２５０１０１；２．济宁市药品检验所，山东济宁２７２０２５） 摘要：目的 比较不同企业的复方黄连素片在４种溶出介质中的溶出曲线，为该制剂的质量评价提供参考。 方法 分别在水、０．１ ｍｏｌ・Ｌ 盐酸、ｐＨ ５．９和ｐＨ ７．４磷酸盐缓冲液中，测定１５个厂家复方黄连素片的溶出曲线， 并用． 因子法分析结果。结果在水中有４个厂家的样品与参比制剂溶出过程一致，在０．１ ｍｏｌ・Ｌ。。盐酸中有３ 个厂家与参比制剂一致，在ｐＨ ５．９和ｐＨ ７．４缓冲液中分别仅有１个厂家与参比制剂一致。结论 多数厂家与参 比制剂的溶出曲线有显著差异，建议对溶出度进行规定以提高该药品质量。 关键词：复方黄连素片；溶出曲线ｉ 因子 中图分类号：Ｒ９２７．１ 文献标识码：Ａ文章编号：２０９５—５３７５（２０１３）０４—０２０８—００３ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅｓ ｏｆ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｈｕａｎｇｌｉａｎｓｕ Ｔａｂｌｅｔｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓ ＧＵＯ Ｄｏｎｇ．ｘｉａｏ ，ＬＩＮ Ｙｏｎｇ．ｑｉａｎｇ ，ＬＩＵ Ｊｉｎ—ｈｕａ ，ＬＩＮ Ｌｉｎ ，ＷＡＮＧ Ｂｉｎｇ （Ｊ．Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｊｉｎａｎ ２５０１０１，Ｃｈｉｎａ； ２．ｆｉｎｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，ｆｉｎｉｎｇ ２７２０２５，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｔｈｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｒｏｉｆｌｅｓ ｏｆ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｈｕａｎｇｌｉａｎｓｕ Ｔａｂｌｅｔｓ ｆｒｏｍ １５ ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓ ｉｎ ４ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｍｅｄｉａ ａｎｄ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｂｏｖｅ—ｍｅｎｔｉｏｎｅｄ ｄｒｕｇ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｄｉｓｓｏｌｕ— ｔｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｉｎ ｗａｔｅｒ，０．１ ｍｏｌ・Ｌ一 ＨＣ１，ｐＨ ５．９ ａｎｄ ｐＨ ７．４ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ｔｈｅｎ，ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｆａｃｔｏｒ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｉｎ ｗａｔｅｒ，ｔｈｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅｓ ｏｆ ４ ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓ ｗｅｒｅ ｓｉｍｉｌａｒ ｔｏ ｔｈａｔ ０ｆ ｔｈｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ（ ≥５０）．Ｉｎ ０．１ ｔｏｏｌ・Ｌ～ＨＣ１，３ ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓ ｗｅｒｅ ｓｉｍｉｌａｒ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ． Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｎ ｐＨ ５．９ ａｎｄ ｐＨ ７．４ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｏｎｌｙ ｏｎｅ ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒ ｗａｓ ｓｉｍｉｌａｒ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅｓ ｏｆ ｍｏｓｔ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆｒｏｍ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｄｒｕｇ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｐｒｅｓｃｒｉｂｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏ１． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｈｕａｎｇｌｉａｎｓｕ Ｔａｂｌｅｔｓ；Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅ ｆａｃｔｏｒ 复方黄连素片为中西药复方制剂，具有清热燥 湿，行气止痛，止痢止泻的功效。处方包括盐酸小檗 碱、木香、吴茱萸、白芍等 Ｊ。我国有多家企业生产 复方黄连素片，处方工艺不尽相同，药品质量也是参 差不齐 Ｊ。药物在多种ｐＨ溶出介质中的溶出曲 电子天平。 １．２试剂复方黄连素片购自９个省份ｌ５个不同 生产厂家均为规格３０ ｍｇ／片的糖衣片；盐酸小檗碱 对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号 １１０７１３—２００９１１，含量为８６．８％）；甲醇为色谱纯，其 线，可以作为依据来评价药物的内在质量差异 Ｊ。 余试剂为分析纯。 ２方法与结果 本实验考察了９个省份１５个厂家的复方黄连素片， 在４种不同ｐＨ溶出介质中盐酸小檗碱的溶出曲 线，并用ｆ’因子法对测定结果进行了分析和比较， ２．１ 测定条件的选择参照《中国药典）２０１０年版 （二部）盐酸小檗碱片的溶出度测定方法和相关文献 报道＿４ ］，采用篮法ｉ贝４定。考察的４种不同ｐＨ值的 溶出介质包括水、０．１ ｍｏｌ・Ｌ 盐酸、ｐＨ ５．９和 为该药物的质量评价提供了依据。 １仪器与试剂 １．１仪器ＶＫ７０２５一ＶＫ８０００瓦里安全自动溶出 ｐＨ ７．４的磷酸盐缓冲液（将浓度均为０．０５ ｍｏｌ・Ｌ 的ＮａＨ２ＰＯ 和Ｎａ２ＨＰＯ 溶液按９０：１０和１９：８１体积 比混合，可分别得到ｐＨ ５．９和ｐＨ ７．４的缓冲液）。 仪；ＺＫＴ一１８真空脱气仪（天大天发科技有限公 司）；Ａｇｉｌｅｎｔ １２００高效液相色谱仪；Ｓａ￣ｏｆｉｕｓ ＣＰ２２５Ｄ 药学研究・．￣ｕｍａｌ ｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０１３ Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．４ ２．２色谱条件采用Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ】８柱（４．６ ｍｍ×２５０ ２．４．５ 回收率精密量取２．４．１项下４种对照品 ｍｍ，５ Ｉｘｍ），以乙腈一０．０３３ ｔｏｏｌ・Ｌ 磷酸二氢钾溶 储备液各２０、２５、３０ ｍＬ（各３份），置于５０ ｍＬ量瓶 液（４０：６０）为流动相，流速为１．０ ｍＬ・ｍｉｎ～，检测 波长为２６５ ｎｍ，柱温３５ ｃＣＩ。 ２．３溶出曲线测定方法照溶出度测定法［《中国 药典｝２０１０年版（二部）附录ｘ ｃ第一法］，４种溶出 介质各１ ０００ ｍＬ，转速为１２０ ｒｐｍ，每批样品各取６ 片，依法操作，分别经３０、４５、６０、７５、９０、１０５、１２０ ｒａｉｎ 时，取溶液５ ｍＬ（并及时补充３７ ｑＣ的空白溶出介质 ５ ｍＬ），滤过，精密量取续滤液取２．０ ｍＬ置１０ ｍＬ量 瓶中，加溶出介质稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液 作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品适量，精密 称定，分别以４种溶出介质溶解并稀释成每１ ｍＬ含 盐酸小檗碱６ Ｉ，ｚｇ的溶液，作为对照品溶液。分别精 密吸取对照品溶液与供试品溶液各２０ ，照高效液 相色谱法测定，以外标法计算每片的溶出量。溶出量 与标示量的比值即为该时间点的溶出度。 ２．４方法学验证 ∞ 舳 ２．４．１ 线性关系考察取盐酸小檗碱对照品适量， 精密称定，分别以４种溶出介质溶解并稀释成每１ ｍＬ含盐酸小檗碱１２ ｇ的溶液，作为对照品储备 液。分别精密吸取该储备液１、２、５、１０、１５、２０／．ｚＬ进 样，以盐酸小檗碱峰面积Ａ为纵坐标ｙ，以进样量 （ ｇ）为横坐标 ，进行线性回归。在水、０．１ ｍｏｌ・ Ｌ 盐酸、ｐＨ ５．９和ｐＨ ７．４的磷酸盐缓冲液４种溶 出介质中回归方程分别为Ｙ＝４ １９６．１２Ｘ＋２．０４（ｒ ＝０．９９９ ６）、Ｙ＝４ １５５．９６Ｘ＋３．５３（ｒ＝０．９９９ ８）、ｙ ：》｝｝｛｛ｌ｝｛｝；旷旷旷＿＝４ ３０５．９６Ｘ＋２．８７（ｒ＝０．９９９ ８）和Ｙ＝４ ３８１．７１Ｘ ＋１．６９（ｒ：０．９９９ ５），在４种溶出介质中线性良好， 线性范围分别为０．０１２ ６—０．２５１ ２、０．０１２ ０～ ０．２４０ ２、０．０１１ ８～０．２３７ ０、０．０１３ ７—０．２７１ ２ Ｉｘｇ。 ２．４．２专属性试验取复方黄连素片的原辅料，分 别用４种溶出介质配制盐酸小檗碱的空白阴性溶 液，按２．２项下色谱条件测定。结果表明，其他原辅 料对含量测定均无干扰。 ２．４．３精密度试验取２．４．１项下对照品储备液， 精密吸取ｌＯ Ｌ，重复进样５次。在４种溶出介质 中，盐酸小檗碱峰面积的ＲＳＤ分别为０．３１％、 ０．３５％、０．３５％和０．４０％，表明仪器精密度良好。 ２．４．４稳定性试验取２．４．１项下对照品储备液， 于０、２、４、６、８、１２、２４ ｈ分别进样，进样量１０ Ｌ。在 ４种溶出介质中，盐酸小檗碱各时间点峰面积的 ＲＳＤ分别为０．５０％、０．６１％、０．５０％和０．４４％，表明 在４种溶出介质中盐酸小檗碱２４ ｈ内稳定。 中，分别按处方量加入空白原辅料，用相应溶出介质 振摇并稀释至刻度，摇匀，配制成相当于８０％、 １００％、１２０％浓度的样品，滤过，取续滤液。各取２Ｏ 进样，计算回收率。４种溶出介质中平均回收率 （ ＝９）分别为１００．８％（ＲＳＤ＝０．８５％）、９８．８％ （ＲＳＤ＝０．５５％）、９９．１％（ＲＳＤ＝０．６７％）和９８．６％ （ＲＳＤ＝０．６３％）。 ２．５测定结果９个省份共１５家生产企业的１５ 批复方黄连素片在４种溶出介质中的溶出曲线见图 １～４ ＾ ０髓弼瓣 ∞ 帅 加 Ｏ 时ＩＮ（ｍｉｎ） 图１ 复方黄连素片在水中的溶出曲线 － 旷时间（旷旷群荨尊 ｒａｉ旷ｎ、旷 旷旷旷圹旷 旷旷旷 蛐 旷：｝旷线 图３复方黄连素片在ｐＨ ５．９溶液中的浴出曲线 ２．６溶出曲线的比较多ｐＨ值溶出曲线的绘制 已成为剖析与表达固剂内在品质的重要手段。 采用． 相似因子法 ’ ，我们对以上１５家生产企业 的产品进行了溶出曲线的比较。选择原研厂家Ａ 厂样品（批号：５５１２０００１）作为参比制剂，其余１４家 生产企业的样品作为受试制剂。参比制剂时间点的 选择及该时间点参比制剂的溶出均值见表ｌ。ｌ４家 Ｌ旷旷旷旷 旷 旷旷 旷｝旷｝旷｛旷｛旷Ｉ旷｝ 药学研究・￣ｕｍａｌ Ｄ厂 ｄ ｄ “ｆ ｆ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０１３ Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．４ 质中一致，其余８个厂家在４种介质中均不一致。 在水中与参比制剂溶出一致的生产企业有４家，在 ０．１ ｔｏｏｌ・Ｌ 盐酸中一致的有３家，在ｐＨ ５．９磷酸 盐缓冲液中一致的有１家，在ｐＨ ７．４磷酸盐缓冲液 中一致的有１家。 ３讨论 ３．１ 复方黄连素片生产厂家众多，制药工艺比较传 统，质量标准控制不完善。根据实验结果，不同生产 企业产品的体外溶出过程有很大的差异，这很可能 导致其临床疗效的不同。本文建立了复方黄连素片 的溶出曲线测定方法，通过溶出曲线来进一步评价 ：｝｝｝｛｝Ｉ｝｝：＝ 旷旷旷旷旷旷旷旷 旷旷 其体内溶出过程，对于该制剂的质量控制和临床疗 效都具有很重要的意义。 表１ 参比制剂在４种溶出介质中的取样时间及相应溶出均值 表２ 值计算结果 ｐＨ ７．４溶液 是非常有必要的。根据１５家企业溶出曲线的测定 情况，建议溶出度的测定以水为溶出介质，照２．２和 ２．３项下测定，经９０ ｍｉｎ时取样，限度为标示量 的７Ｏ％ 。 参考文献： 生产企业 批号 水０．１ ｍｏｌ・ＬＩ１盐酸ｐＨ ５．９溶液［１］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典２０１０年版（一 部）［Ｓ］．北京：中国医药科技出版社，２０１０：９２３． ［２］ 林林，林永强，汪冰，等．复方黄连素片质量分析［Ｊ］． 药学研究，２０１３，３２（３）：１５７—１５８． ［３］ 张启明，谢沐风，宁保明，等．采用多条溶出曲线评价 口服固剂的内在质量［Ｊ］．中国医药工业杂志， ２００９，４０（１２）：９４６—９５５． ［４］ 王红霞，蒋丽英．ＨＰＬＣ法测定复方黄连素片中盐酸小 檗碱的溶出度［Ｊ］．中国药房，２０１１，２２（８）：７５８—７５９． 注 ３５０时，受试制剂与参比制剂溶出过程一致 ［５］ 谢元超，巩丽萍，徐晓洁，等．自身对照法测定复方黄 连素片溶出度［Ｊ］．药物分析杂志，２０１２，３２（８）：１４８６ —３．２《中国药典》２０１０年版（一部）对复方黄连素 片的崩解时限进行了规定，并未对溶出度进行规定。 １４８９． 溶出是药物起效的前提，溶出时间过长可能会影响 疗效。以上１５家企业的样品崩解时限均符合药典 ［６］ 谢沐风．溶出曲线相似性的评价方法［Ｊ］．中国医药工 业杂志，２００９，４０（４）：３０８—３１１． 规定。但是研究发现，Ｂ厂的样品在１２０ ｍｉｎ时，在 ４种溶出介质中溶出量均未达到５０％；Ｎ厂的样品 ［７］ 陈贤春，吴清，王玉蓉，等．关于溶出曲线比较和评价 方法［Ｊ］．中国医院药学杂志，２００７，２７（５）：６６２—６６４． ［８］ 姜雄平．中成药固剂溶出度测定的探讨［Ｊ］．中国 药品标准，２００５，６（３）：６６—６７． 在１２０ ｍｉｎ时，在４种溶出介质中溶出量甚至均未 达到２０％。为了规范生产厂家的药品质量，确保复 方黄连素片的临床疗效，增加该制剂溶出度的检查
