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（一）课题分析：

课题名称：HPLC法同时测定食品色素 研究对象（关键词）：HPLC法 测定 色素

该课题属于化学工程与工艺专业，该课题所涉及的主要知识是分析化学，又特别是仪器分析和色谱分析的内容，又包含食品检验科学，医学检验等学科的范畴。

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。 用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好，且须在色谱仪中进行。

食用色素，是色素的一种，即能被人适量食用的可使食物在一定程度上改变原有颜色的食品添加剂。食用色素也同食用香精一样，分为天然和人工合成两种。天然使用色素是直接从动植物组织中提取的色素，对人体一般来说是无害，如红曲、叫绿素、姜黄素、胡萝卜素、苋菜和糖色等，就是其中的一部分。人工合成食用色素，是用煤焦油中分离出来的苯胺染料为原料制成的，故又称煤焦油色素或苯胺色素，如合成苋菜红、胭脂红及柠檬黄等等。这些人工合成的色素因易诱发中毒、泻泄甚至癌症，对人体有害，故不能多用或尽量不用。 测定食品色素可用多种方法如薄层色谱法，纸色谱法，但鉴于HPLC法与普通方法的区别，它有明显的优点，其检测过程控制各实验条件：吸附，解吸附，浓缩，温度及体积，梯度洗脱，变波长检测，变蓝灵敏度显著提高，各色素分离度高，回收率满意。 （二）检索工具的介绍：

介绍的检索工具名称：SpringerLink数据库

SpringerLink是居全球领先地位的、高质量的科学技术和医学类全文数据库，该数据库包括了各类期刊、丛书、图书、参考工具书以及回溯文档。SpringerLink为科研人员及科学家提供强有力的信息中心资源平台。Springer电子期刊数据库是德国施普林格

(Springer-Verlag)世界著名科技出版集团的产品，通过Springer LINK系统提供学术期刊及电子图书的在线服务。Springer LINK电子期刊包含439种学术期刊，其中近400种为英文期刊。目前Springer Link所提供的全文电子期刊按学科分为11个在线图书馆（范围）：(1)生命科学(life sciences)含105种期刊；(2)医学(medicine)含168种期刊；(3)数学(mathematics)含77种期刊；（4）化学(chemical sciences)含36种期刊；(5)计算机科学(computer sciences)含45种期刊，(6)经济(economics)含31种期刊；(7)法律(law)含5种期刊；(8)工程学(engineering)含52种期刊；(9)环境科学(environmental sciences)

含34种期刊；(10)地球科学(geosciences)含50种期刊；(11)物理学与天文学(physics and astronomy)含61种期刊。该系统收录1996年至今的期刊，对1996年以前的期刊将逐步开通。Springer LINK中的大多数全文电子期刊是国际重要期刊，它是科研人员的重要信息源。该数据库采用校园范围的IP地址控制使用权限，不需要帐号和口令，使用方便。另外，其很大的一个特点是及时性好。

SpringerLink 检索：

1. 简单检索：在检索窗口输入检索词，默认在所有文档中检索。

2. 高级检索：

根据所掌握的检索条件可选择：全文、标题、摘要、作者、编辑、ISSN、ISBN、DOI、日期进行检索。

3. 快速检索：

在检索结果显示页面，提供“在所有内容之内检索、在检索结果之内检索”，也可按篇名、出版物名称进行首字母快速检索；可以选择“内容发行状态、Springer Link Date、内容类型、语种、学科、版权、作者、编辑 ”来缩小检索范围。 SpringerLink浏览：

1. 按出版物内容类型浏览：所有内容类型、出版物、期刊、从书、图书、参考工具书、Protocols。

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（三）检索策略： （使用SpringerLink检索工具）

打开沈阳理工大学图书馆网页,在电子资源一栏里选择更多数据库，打开之后在外文数据库里选择Springer Link期刊数据库打开，在基本检索的按关键词全文检索的对话框中输入关键词，在本课题的检索词中选择HPLC和PIGMENTS两个词先做逻辑或关系控制扩大检索范围，提交后命中条数很多，但是查准率不高，返回重新控制逻辑关系，用逻辑与进行缩检，Search For (Boolean) > ti:(HPLC and PIGMENTS),命中20条结果，在结果中有与课题较相关的文摘，通过分析命中的文章，查准率不高，为了查找更多更精确的结果需要改变检索策略，将三个检索词都用到检索策略中,选择标题检索字段HPLC.PIGMENTS.TEST三个词之间都用逻辑与的关系，但是命中零个结果，修改策略将test用无限截词控制符test*,结果还是零条；通过进一步分析，应将HPLC.PIGMENTS做逻辑与的关系而将TEST做逻辑非的关系，并且前两者选择标题字段，逻辑检索如下：ti:(HPLC PIGMENTS) NOT”TEST*”检索结果命中1；为了更精确的查找，插入按词组查找，用词组“FOOD PIGMENTS”替换前面的逻辑检索策略中的PIGMENTS，命中的结果为零条；用DETERMINE替换TEST依照前两种策略检索。用>ti:(HPLC PIGMENTS) NOT“DETERMIN*”检索得11条结果，通过基本检索策略的改变查准率逐渐提高，检出了几篇与课题有关的文献。检索界面还有高级检索，点击高级检索出现了许多项目框，用这种检索可以将范围缩小，选择标题字段对话框，填写HPLC (pigments or food) 日期选择全部，排序选择相关性，其它的项不填，点击检索得>ti(HPLC and (pigments or food)),命中49条，在这些结果中找出与课题相关的文摘，但由于所查的条数多查全率挺高但是查准率却比较低，通过几次改变策略，如将food 和.pigments改成逻辑与的关系检测不出结果，又如将它们改成一个词组再检，也检测不出结果。只取前两个词之一进行再一次的检索，只取关键词HPLC和PIGMENTS，还是在标题栏里填写：

HPLC PIGMENTS 结果命中20条，从这些结果中看出查全率和查准率都符合要求，而且能从中找到与课题很相关的文章。从这些结果中可以发现不同的策略中也能检出一些相同的文献结果，从中找出几条并进行翻译，得到与本课题相关的文献。（四）检索策略的查准率： 20篇中有6篇与课题相符合，查准率为33.3%. (五)课题的解决方案：

将固体试样研碎，取2.5克加3毫升水和2毫升乙酸-TBAP溶液，进行均质化，加1毫升链霉蛋白酶水溶液，于40度振荡3小时，在此溶液中加2%氨水5毫升，乙醇25毫升，再均质一次，再加5毫升乙醇，冰冷5分钟之后，离心分离2000转每分，20分钟，取上清液浓缩至5毫升以下，在冰水中冷却后加1%TBAOH1毫升，通过3个串联的C18驻，然后洗涤容器，然后把三个驻逆向串连，用甲醇-TBAP将色素溶出洗脱，检测回收率且回收率范围要良好，色素的检出限为0.003ug/g-0.006ug/g .五篇中文结果：

1.出自维普中文期刊

文献片名：食品中合成色素的检验技术新编（连载三） 著者：李明元

著者单位： 天津市开发区卫生防疫站

文摘：2.3链霉蛋白酶预处理-HPLC食品中12种色素同时测定 食品中色素分析时，发现在食品中添加色素后立即分析，可以得到良好的回收率，如果放置一昼夜再分析，回收率降低，其原因可能是色素特别是氧杂蒽系色素被蛋白质吸附。用链霉蛋白酶分解蛋白质后，用氨水-乙醇溶液提取色素，减压浓缩后，在浓缩液中加氢氧化四正丁胺，过Sep—pakplustC18柱，用甲醇-TBAP（pH5．0）溶液洗脱，用HPLC法对12种色素进行分离测定，检出限0．003μg／g-0．006μg／g。各种食品中色素添加回收率良好。 期刊名称：《口岸卫生控制》，卷期号：2005年第10卷第6期，页码：38，出版时间：2005年

2. 出自维普中文期刊

文献片名：HPLC法测定辣椒及其制品中苏丹红色素含量 著者：李刚

著者单位：中国检验检疫科学研究院

文摘：[目的]建立辣椒及其制品中4种苏丹红(sudan)色素的高效液相色谱同时测定方法。[方法]采用反相高效液相色谱法，以乙腈一酸性水溶液为流动相，采用梯度洗脱，以二极管阵列检测器(PDA)定性定量测定辣椒制品中的4种苏丹红色素，并以LC—MS对阳性样品中的苏丹红成分进行了结构确证。[结果]在添加浓度1～4mg／k鼻范围内，4种苏丹红色素的回收率在81．92％-97.87％之间，相对标准偏差(RSD)≤5．23％，最低检出限(信噪比S／N=3)分别为0．102、0．097、0．074、0．099mg／kg。[结论]本方法经实际应用证明，具有良好的稳定性和重现性，步骤简单、可操作性强。 期刊名称：《检验检疫科学》，卷期号：2005年第15卷第2期 页码：43 出版时间：2005年

3.出自维普中文期刊

文献片名：番茄红素HPLC测定的研究 著者：范青生

著者单位: 中德联合研究院

文摘：本实验研究了番茄红素的HPLC测定方法。选用V乙腈：V甲醇：V二氯甲烷

=21：21：8的流动相，检测波长为412nm，能很好地分离番茄红素及其异构体；番茄红素的保留时间为5．83min，回收率范围在90．55—105．48％之间。实验证实，高纯度全反

式番茄红素在光照和接触空气后，极易转变为13-或9-顺式异构体和氧化产物；无水乙醇处理法可使提取物中的番茄红素纯度提高2．5倍；分光光度法测得的番茄红素含量平均是HPLC法的2．4倍。 期刊名称：《中国食品添加剂》，卷期号：2004年第一期 页码：106 出版时间：2004年

4. 出自维普中文期刊

文献片名：用HPLC法测定红酵母中β—胡萝卜素的含量

著者：曲霞

著者单位: 山东烟台化工总厂色说化验室

文摘：对从红酵母中提取β－胡萝卜素的方法进行了初步探讨，并以高压液相色谱方

法测定了红酵母中β－胡萝卜素的含量，采用ＯＤＳ为固定相，以甲醇：氯仿为流动相，检测波长为４５０ｎｍ，该方法准确，快速，可靠，平均回收率为９２．０％。

期刊名称：《山东大学学报自然科学版》 卷期号：1997年第32卷第2期 页码：237 出版时间：1997年

5.出自万方数据库

文献片名：食品中合成色素高压液相色谱测定方法

会议名称： 第二届全国食品卫生学术会议 会议时间： 198510 会议地点：辽宁兴城

摘要：采用高压液相色谱仪对食品中所使用的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、

亮兰、靛兰及赤藓红寻七种人工合成酸性色素进行分离测定的实验研究，并与现行的部颁方法作对比。结果证实，该法的准确度与精密度均能满足日常分析工作的要求，可同时测定食品中常见的绿色、棕色、桔红色等拼色。 五篇外文结果：

1.出自Springer Link期刊数据库

文献片名：Rapid isocratic HPLC analysis of beta-carotene in red peppers ( Capsicum

annuum L.) and food preparations（快速用HPLC法分析红辣椒中的胡萝卜素和食品的准备工作）

作者：M. Weissenberg1, A. Levy1, I. Schaeffler1, E. Menagem1 and M. Barzilai1 作者单位：Laboratory of Natural Products Chemistry. ISSN 0009-53 (Print) 1612-1112 (Online) Volume 46, Numbers 7-8 / 1997年10月 DOI 10.1007/BF02490877 页码 399-403

摘要：A simple, rapid high-performance liquid chromatography method has been devised

in order to separate and quantify β-carotene present in red pepper (Capsicum annuum L.) fruits and food preparations. （一种简单，快速的高效液相色谱法已制定为了分离和测定量化β-胡萝卜素存在于红辣椒的水果和食品的准备工作中） 2..出自Springer Link期刊数据库

文献片名： Analysis of food dyes E 110, E 111, and E 124 in fish samples by ion pair partition HPLC（用高效液相色谱法分析鱼样本中的食品染料E110,E111,和E124）

作者：Kurt Aitzetmüller1 und Erika Arzberger1

作者单位：nUnilever Forschungsgesellschaft mbH and NATEC, Gesellschaft für naturwissenschaftlich-technische Dienste mbH, Behringstr.

ISSN 1431-4630 Volume 169, Number 5 / 1979年9月

DOI 10.1007/BF01127002 页码： 335-338

摘要：The isomeric food dyes E 110 and E 111 can be separated by ion pair partition HPLC on reversed-phase columns.（异构食品染料E110和E111可用高效液相色谱法对分区反相驻对其分离）

3..出自Springer Link期刊数据库

文献片名：An improved HPLC system for the analysis of photosynthetic pigments（一种改进的高效液相色谱系统对光合色素的分析）

作者：G. W. Francis1, B. Huseby1

作者单位：Department of Chemistry, University of Bergen, Allégaten 41, N-5007 Bergen,

Norway

ISSN 0009-53 (Print) 1612-1112 (Online) Volume 35, Numbers 3-4 / 1993年2月

DOI 10.1007/BF02269701 页码：1-192

摘要：Carotenoids and chlorophylls are rapidly analysed in a single chromatographic

separation.（类胡萝卜素和叶绿素用单一色谱分离法被迅速测定）

4.出自EBSCO数据库

文献片名：Study of selective feeding in the marine cladoceran Penilia avirostris by HPLC

pigment analysis.（用高效液相色谱分析的方法对在海洋中选择性取食的水蚤的色素的研究） 作者: Liu, Xue-Jun1

作者单位:1Department of Biology, The Chinese University of Hong Kong, Shatin, New Territories, Hong Kong

来源:Journal of Experimental Marine Biology & Ecology;

Apr2006, Vol. 331 Issue 1, p21-32, 12p 文献类型:Article

摘要：Pigment degradation rates ranged from 13.73% for alloxanthin to 36.62% for chlorophyll a. Clearance rates measured in the laboratory provided further evidence of strong preference for diatoms and cryptophytes, and avoidance of dinoflagellates.（色素叶绿素的降解率从13.73%增加到36.62%，实验室中的清除率测定为测定硅藻而避免甲藻提供了进一步的更有力的证据）

ISSN:00220981

DOI:10.1016/j.jembe.2005.09.019 5..出自Springer Link期刊数据库

文献片名：Extraction of chlorophyll and carotenoid pigments from Antarctic benthic mats for analysis by HPLC （提取来自南极海底垫的叶绿素和类胡萝卜素的高效液相色谱分析）

作者：Malcolm T. Downes1, Liana Hrstich1 and Warwick F. Vincent1, 2

作者单位：(1) National Institute of Water and Atmospheric Research Ltd. Freshwater, PO Box 8602, Riccarton, Christchurch, New Zealand. ISSN 0921-71 (Print) 1573-5176 (Online) Volume 5, Number 6 / 1993年12月

DOI 10.1007/BF021841 页码：623-628

摘要：The efficiency of 9:1 acetone-water, DMSO and boiling 9:1 ethanol-water in

extracting chlorophyll and carotenoid pigments from benthic cyanobacterial mats from Antarctica for HPLC (high performance liquid chromatography) analysis was examined.（用9：1丙酮水，DMSO和沸腾9：1乙醇水提取叶绿素和类胡萝卜素色素底栖藻垫的高效液相色谱法分析研究的效率已被测定）