２ｏ１１年第８期（总第１７５ 文献综述 奶牛乳腺炎诊断方法的研究进展 赵玉明 丁守强 （山东省青州市黄楼事处畜牧兽医站２６２５１８） 中图分类号：￥８５８．２６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００７．１７３３（２０１１）０８．００８１．０３ 奶牛乳腺炎（ｍａｓｔｉｔｉｓ）是指奶牛乳腺内由病原微生物感 染所引起的炎症反应，是所有奶牛疾病中发病率最高， 危害最为严重的一种疾病。根据是否出现临床症状可将 乳腺炎分为两种类型：临床型乳腺炎和隐性乳腺炎。前 者具有明显的临床症状，容易被发现并及时治疗，后者 则因缺乏任何肉眼可见的临床症状，诊断相对困难。目 前诊断隐性奶牛乳腺炎的常用方法主要有牛奶体细胞计 数（ｓｏｍａｔｉｃ ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｓ，ＳＣＣ）、美国加州乳腺炎诊断试验 （Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ ｍａｓｔｉｆｓ ｔｅｓｔ，ＣＭＴ）及乳汁细菌分离鉴定，本文 对这些诊断方法的优缺点作一综述。 １体细胞计￣（ｓｃｃ） 正常牛奶中的体细胞主要为巨噬细胞，约占体细胞 总数的６６％～８８％，其余为中性粒细胞（约占１—１１％）和上皮 细胞等。乳腺感染时中性粒细胞数量急剧上升，导致牛 奶中体细胞数量显著升高【１］。因此，临床上常以体细胞数 量升高作为隐性乳腺炎的诊断指标之一。然而，国际上 有关ＳＣＣ的诊断标准至今仍未完全统一。传统的观念认为 牛奶中ＳＣＣ超过５０万个，ｍ１即可诊断为隐性乳腺炎ｆ２Ｊ，但 也有人认为牛奶ｓｃｃ超过２０万个／ｍｌ［ 或１０万个，ｍ１Ｉ 便 可诊断为隐性乳腺炎。 当前利用丹麦ＦＯＳＳ公司生产的体细胞计数仪进行牛 奶中ＳＣｃ测定是诊断隐性乳腺炎的常用方法。其基本原理 是向牛奶中加入细胞溶解液使牛奶中体细胞破碎而分解 出ＤＮＡ，混入的荧光染料可与ＤＮＡ结合。经以上处理的 牛奶样品通过计数仪的毛细管时被仪器读取相应信息而 计算出ＳＣＣ数值ｆ５】。ＳＣＣ与牛奶中多种指标存在紧密联 系，也可以作为其他方法诊断乳腺炎的参考［６】。虽然ＳＣＣ 法诊断乳腺炎具有快速方便的特点，但由金葡菌引起乳 腺炎时ＳＣＣ值却通常小于２０万个／ｍｌ。这种情况在奶牛泌 乳初期患乳腺炎时表现的尤为明显【７】。另外，在奶牛分娩 前后一段时间内牛奶中体细胞数目会发生生理性的变 化，分娩后ＳＣＣ会急剧的上升，５０ｄ后又会降低到最小 值，在泌乳后期又会缓慢的升 ，这些都可影响￣ｆＪｓｃｃ 方法诊断乳腺炎的准确性。 ２细菌学鉴定 引起奶牛乳腺炎发生的微生物有细菌、病毒、支原 体等多达１３０多种。其中主要病原微生物是金黄色葡萄球 菌、无乳链球菌、乳房链球菌等。通过培养乳汁进行微 生物鉴定是诊断乳腺炎的常用方法。利用细菌鉴定诊断 乳腺炎的方法不断被完善，如扬州大学孙怀昌等研制出 了选择性鉴别不同病原菌的培养基ｆ８】可以方便细菌培养鉴 定。但细菌学诊断隐性乳腺炎仍然存在许多局限性。普 通培养基对某些病原微生物，如支原体、病毒等无法培 养鉴定。另外由于采集奶样的牛场环境微生物丰富，不 易保证采集的奶样未受环境污染，故诊断隐性乳腺炎时 容易产生假阳性结果，而且细菌鉴定工作量大，至少需 要２—３ｄ才能做出鉴定结果。 ３奶样电导率测定 奶牛发生乳腺炎时其奶样中的Ｎａ 、Ｉ（＋含量上升，因 此可以利用牛奶不同的电导率诊断乳腺炎１９，１ｏ】。牛奶口Ｈ的 变化及乳脂含量的下降也可以影响电导率。已经证实电 导率与牛奶中ＳＣＣ存在密切的关系ｎ１】。对电导性能的测 试信号可以转变为计算机信号，故而此法可以实现在线 自动检测。电导法检测乳腺炎是目前为数不多的商业化 的技术之一。我国已有西南民族学院８６．Ｉ型隐性乳腺炎诊 断仪、西北农业大学ＸＮＤ．Ａ型检奶仪、山西农业大学ＩＲＤ 型乳腺炎电子检测仪。但乳腺炎并非是影响电导率的唯 一因素，所以这是用电导法检ｔｉｄａｌ腺炎的一个缺点。另 外牛乳汁电导率数值有个体差异，约１４％牛乳汁电导率高 于正常值，约２６％牛乳汁电导率低于正常值 】，使该方法 的应用受到了。 ８１ 山东畜牧兽医 ４ ＰＣＲ诊断方法 Ｐｈｕｅｋｔｅｓ等¨３１建立了一种以１６ｓ ２３ｓｒＤＮＡ间隔区为扩 增靶序列的多重ＰＣＲ检测方法。试验测试了１１７份亚临床 感染的乳腺炎奶牛奶样，结果均为阳性，同时证实金黄 色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和乳房链球菌为 主要的乳腺炎病原菌。Ｒｉｆｆｏｎ等 也以１６ｓ～２３ｓｒＤＮＡ间隔 区为扩增靶序列建立了多重ＰＣＲ检测方法，检测奶样中引 起奶牛乳腺炎的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球 菌、停乳链球菌、乳房链球菌和副乳房链球菌６种主要病 原菌，结果均为阳性，试验表明以１６ｓ一２３ｓｒＤＮＡ间隔区为 扩增靶序列建立的多重ＰＣＲ检测方法是一种快速敏感和特 异的乳腺炎诊断方法。但该方法受技术操作的在基 层推广有较大的困难。 ５美国加州乳腺炎检验法（ＣＭＴ）及其类似方法 该方法的基本原理是用一种阴离子表面活性物质一烷 基或烃基硫酸盐，使乳汁中体细胞破裂，释放出其中的 核酸，ＣＭＴ试剂与核酸物质结合产生沉淀或凝胶，细胞 中聚合的ＤＮＡ是ＣＭＴ产生阳性反应的主要成分，乳汁中 体细胞数目越多，则释放ＤＮＡ越多，产生凝胶也就越 多，凝集越紧密。根据这一原理我国兰州（ＬＭＴ）、北京 （ＢＭＴ）、杭州（ＨＭＴ）等也研制出了诊断隐性乳腺炎的类似 试剂。其它化学检验法还包括过氧化钠法、苛性钠凝乳 试验法、氯化钙凝乳试验及氯化物银试验等。 ＣＭＴ及其类似剂检测方法可以实现快速的牛旁检 测，操作方法简便，适于在生产中推广。但此方法的不 足之处是有时遇到可疑病例的情况无法进行最终判定。 ６其他诊断方法 ６．１ 酶法ｌｓｈｉｋａｗａ和Ｋｉｔｃｈｅｎ￣ 研究证实，乳酸脱氢酶 （ＬＤＨ）主要来自被损害的上皮细胞和大量的乳汁白细胞， ＬＤＨ活性增加反映了白细胞大量聚集的炎症过程和乳腺 组织的损害程度。黄利权等ｆ 研究发现，不同的乳腺炎 病原微生物感染乳腺时呈现不同的酶象变化，与阴性感 染的乳腺相比，ＬＤＨ、谷草转氨酶（ＧＯＴ）等活性均增强。 在金黄色葡萄球菌感染时，ＬＤＨ的活性最高，并且认为 ＬＤＨ在隐ｌ生乳腺炎病程中起重要作用。 Ｎ一乙酰一 —Ｄ氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧａｓｅ）也可以反映乳 腺炎发生情况 】。ＮＡＧａｓｅ是一种细胞内溶酶体酶，炎症 发生时由白细胞释放进入奶样。有研究表明，ＮＡＧａｓｅ活 ８２ ２０１１年第３２卷 性与ＳＣＣ存在密切的关系，可以精确的反映炎症水平。以 ＮＡＧａｓｅ作为参照物进行诊断乳腺炎具有很大的应用前 景，目前已有电化学的方法对其进行研究 ｌ ８Ｉ。其他报道 的可以作为诊断乳腺炎标志物的酶还有葡萄糖苷酸酶（【｝一 ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、纤溶酶（Ｐｌａｓｍｉｎ）等。 纤溶酶原在炎症发生时可从血液进入牛奶并转化成纤维 蛋白溶酶。后者已经确定与ＳＣＣ存在联系，但其含量受牛 体生理因素和环境因素的影响Ｉ １。赵兴绪等 的研究表 明，ＬＤＨ和ＮＡＧ在不同类型的乳腺炎中，其活性差异郜 极显著，在分析中表现出了较高的诊断价值。 ６．２急性时相蛋白（ＡＰＰ） 目前研究较多的ＡＰＰ是结合珠 蛋白（Ｈｐ）和淀粉样蛋￣Ａ（ＳＡＡ） 。两者在机体急性炎症 发生的时候含量可以上升１００倍。ＨＤ是牛的一种主要 ＡＰＰ，该物质主要在肝细胞中合成，在不同炎症因子的刺 激下合成增加。在正常情况下，牛奶中Ｈｐ含量极低以致 无法检出，而在乳腺炎症发生过程中，由于血一乳 障通 透性升高，肝脏合成的Ｈｐ可通过血一乳屏障而从血液进入 到牛奶中。因此，牛奶中Ｈｐ含量升高被认为是发生奶牛 隐性乳腺炎的特异性标志 。 ，。 。并且目前已经有针对Ｈｐ 的光学免疫传感器研制成功 Ｉ。 ＳＡＡ是一种载脂蛋白，且与奶样中ＳＣＣ存在密切的联 系。有研究表明其可以作为。。。种诊断乳腺炎的标志物 。但Ｕｌｒｉｋａ Ｇｒ６ｎｌｕｎｄａ的研究表明在奶牛牛奶中检测Ｈｐ 比检测ＳＡＡ更为容易 ２６１。 ７结语 奶牛乳腺炎作为奶牛养殖业中的常发病、多发病， 每年造成ｆ＝三大的经济损失。奶牛乳腺炎的发生对牛奶的 质量也产生很大影响，病原奶流入市场容易造成公共ｌｆＪ 生事件。所以对奶牛乳腺炎的科学防治一直是奶牛场非 常重视的一项工作。 目前ＳＣＣ法、ＣＭＴ及类方法、病原菌鉴定法是生产 中诊断奶牛隐性乳腺炎的主要方法。其中ＳＣＣ方法需要购 买体细胞计数仪，成本较高；ＣＭＴ及类方法检测成本 低、检测速度快，但不能对可疑病例做出准确的诊断； 病原菌鉴定法对了解牛场的病原种类、科学防控具有重 要意义，但检测周期需２～３ｄ，耗费较大人力物力。ＰＣＲ方 法也是诊断奶牛隐性乳腺炎的一种较可靠的方法。但ＰＣＲ 方法主要停留在实验室诊断中，在生产巾用ＰＣＲ诊断需要 ２０１１年第８期（总第１７５ 一定的专业技术及相关设备，了其推广普及。其他 的诊断奶牛隐性乳腺炎的方法还有电导率、ｐＨ方法，但 【１２］富裕，黄宇翔．奶牛乳腺炎诊断方法研究进展【Ｊ］．奶牛养殖，２００９． ６：３８．４０． 二者缺乏诊断准确性。另外根据牛奶中相关的酶、ＡＰＰ等 在乳腺炎发生时浓度会有所变化，将这些酶或ＡＰＰ作为乳 腺炎发生的标志物，进行乳腺炎的诊断亦有很大应用前 景。 【１３】ｌｓｈｉｋａｗａ Ｈ，Ｓｈｉｍｉｚｕ Ｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｍｐｏｓｉｉｔｏｎ ｏｆ ｗｈｅｙ ｆｒｏｍ ｓｕｂｃｌｉｎｉｃａｌ ｍａｓｔｉｄｓ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｌｅｖａｍｉｓｏｌｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｄａｉｒｙ ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８２， ６５：６３５—６５８． 【１４】Ｋｉｔｃｈｅｎ ＢＪ，Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ Ｇ Ｍａｓｔｉｆｓ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｔｅｓｔｓ ｔｏ ｅｓｉｔｍａｔｅ ｍａｍｍａｒｙ ｇｌａｎｄ ｅｐｉｈｅｌｔｉａｌ ｃｅｌｌ ｄａｍａｇｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｄｉａｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８０， 各种诊断奶牛隐性乳腺炎方法均有不同的侧重点， 还没有一种绝对准确的方法。只有结合几种诊断方法并 根据奶牛不同的生理状况才能科学诊断乳腺炎。建立诊 断成本低、诊断速度快的奶牛隐性乳腺炎确诊方法是一 个重要的发展方向。 参考文献 ［１］Ａｓｈｗｏｒｔｈ ＵＳ，Ｆｏｒｓｔｅｒ ＴＬ，Ｌｕｅｄｅｃｋｅ ＬＯ．Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ ｍａｓｔｉｔｉｓ ｔｅｓｔ ｒｅａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｍｐｏｓｉｉｔｏｎ ｏｆ ｍｉｌｋ ｆｒｏｍ ｏｐｐｏｓｉｔｅ ｑｕａｒｔｅｒｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＤａｉｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９６７，５０：１０７８－１０８２． 【２】ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＤａｉｒｙＦｅｄｅｒａｔｉｏｎ．Ａｍｏｎｏｇｒａｐｈｏｆｂｏｖｉｎｅｍａｓｔｉｆｓ，１９７１． ［３１ Ｒｕｅｇｇ ＰＬ．Ｒｅｉｎｅｍａｎｎ ＤＪ．Ｍｉｌｋ ｑｕａｌｉｔｙ ａｎｄ ｍａｓｔｉｔｉｓ ｔｅｓｔｓ．Ｂｏｖｉｎｅ Ｐｒａｃｔｃｉｔｏｒ，２００２，３６：４１—５４． ［４】Ｈｉｌｌｅ￣ｏｎ Ｊ．Ｅ．Ｒｅｄｅｆｉｎｉｎｇ ｍａｓｔｉｆｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｓｏｍａｔｉｃ ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔ．ＩＤＦ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ．１９９９。３４５：４—６． ［５］Ｃａｒｏｌｉｎｅ Ｓｕｓｈｒｕｔ Ａ．Ｍａｓｔｉｔｉｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｔｒｅｎｄｓ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ．Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２７：４８６＿４９３． 【６】ＭａｆｉａＡ，ＫａｒｉｎＰ、）ｖ＇ＡｓｅＳｔｅｒｎｅｓｊｏ．Ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ ａｎｄ ｓｅｒｕｍ ａｍｙｌｏｉｄＡ ｉｎ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｔｏ ｔｈｅ ｓｏｍａｔｉｃ ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔ ｉｎ ｑｕａｒｔｅｒ，ＣＯＷ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ａｎｄ ｂｕｌｋ ｔａｎｋ ｍｉｌｋ ｓａｍｐｌｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＤａｉｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００７，７４：１９８－２０３． 【７】．Ｋｏｖａａ Ｇ Ｐｏｐｅｌｋｏｖａ Ｍ，Ｔｋａａｉｋｏｖａ Ａ，Ｂｕｒｄｏｖａ Ｏ．Ｉｎｔｅｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｓｏｍａｔｉｃ Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔ ｎａｄ Ａｃｕｔｅ Ｐｈａｓｅ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ Ｓｅｒｕｍ ｎａｄ Ｍｉｌｋ ｏｆＤａｉｒｙ Ｃｏｗｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＤａｉｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００７，７６：５１・５７． 【８】钱科，孙怀昌．奶牛乳腺炎主要致病菌快速鉴别和药敏试验【Ｄ】． 扬州：扬州大学，２００６． ［９】Ｋｉｔｃｈｅｎ Ｂ．Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ ｄａｉｒｙ ｓｃｉｅｎｃｅ：ｍｉｌｋ ｃｏｍｐｏｓｉｉｔｏｎａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｔｅｓｔｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄａｉｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８１，４８：１６７－１８８． ［１Ｏ】Ｕｒｅｃｈ，Ｐｕｈａｎ，Ｓｃｈａｌｌｉｂａｕｍ．Ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｍｉｋｌ ｆｒａｃｔｉｏｎ ａｓ ａｆｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｓｕｂ—ｃｌｉｎｉｃａｌｍａｓｉｔｔｉｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，１９９９，８２：２０４１—２０４１１． ［Ｉ１１ Ｗｏｏｌｆｏｒｄ ＭＷ，ＷｉＵｉａｍｓｏｎ ＪＨ，Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ ＨＶ．Ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｅｌｅｃｔｒｉｃａｌ ｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｏｍａｔｉｃ ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔ ｂｅｔｗｅｅｎ ｍｉｌｋ ｆｒａｃｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ ｑｕａｒｔｅｒｓ ｓｕｂ．ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐａｒｔｉｃｕｌａｒ ｍａｓｔｉｔｉｓ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄａｉｙｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．１９９８．６５：１８７．１９８． ６３：９３８－９８３． ［１６】Ｋｉｔｃｈｅｎ ＢＪ，Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ Ｇ Ｄｕｒｗａｒｄ ＩＧ Ａｎｄｒｅｗｓ ＲＪ，Ｓａｌｍｏｎ ＭＣ． Ｍａｓｔｉｔｉｓ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｔｅｓｔｓ ｔｏ Ｅｓｔｉｍａｔｅ Ｍａｍｍａｒｙ Ｇｌａｎｄ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ Ｃｅｌｌ Ｄａｍａｇｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＤａｉｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８０，６３：９７８—９８３． ［１７】黄利权，施明华，蔡荣订．隐性乳腺炎中体细胞和病原菌及酶间 的相关性【Ｊ】．浙江农业大学学报，１９９５，２１：２４３—２４６． ｔ１８］ＵｒｅｃｈＥ，ＰｕｈａｎＺ，ＳｃｈａｌｌｉｂａｕｍＭ．Ｃｈａｎｇｅｓｉｎｍｉｌｋｐｒｏｔｅｉｎｆｒａｃｔｉｏｎ ａｓ ａｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｓｕｂｃｌｉｎｉｃａｌ ｍａｓｔｉｆｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄａｉｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９， ８２：２４０２—２４１１． ［１９］Ｍｏｔｔｒａｍ ，Ｈａｒｔ Ｊ．，Ｐｅｍｂｅ￣ｏｎ Ｒ．Ｂｉｏｓｅｎｓｉｎｇ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ａｂｎｏｒｍａｌ ａｎｄ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ ｍｉｌｋ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｈｅｌｄ ｉｎ Ｌｅｌｙｓｔａｄ，２０００，１７：１０８—１３． 【２０】ｐｏｌｉｔｉｓ Ｉ，ＮＫ Ｈａｎｇ，ＲＮ Ｇｉｒｏｕｘ．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｆａｃｔｏｒｓ ａｆｅｃｔｉｎｇ ｐｌａｓｍｉｕ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｉｍｌｋ，Ｊ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＤａｉｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９８９，７２：１７１３・１７１８． ［２１】伍涛，赵兴绪．乳腺炎奶牛乳汁体细胞数与主要急性期蛋白和相 关酶的相关性研究【Ｄ】．兰州：甘肃农业大学，２００８． ［２２】Ｅｃｋｅｒｓａｌｌ ＰＤ，Ｃｏｎｎｅｒ ＪＧ Ｂｏｖｉｎｅ ａｎｄ ｃａｎｉｎｅ ａｃｕｔｅ ｐｈａｓｅ ｐｍｔｅｉｎｓ． Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９８８，１２：１６９－１７８． ［２３】Ｇｒｏｎｌｕｎｄ Ｕ，Ｓａｎｄｇｒｃｎ ＣＨ，Ｐｅｒｓｓｏｎ Ｗａｌｌｅｒ Ｋ．Ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ ａｎｄ ｓｅｒｕｍ ａｍｙｌｏｉｄ Ａ ｉｎ ｍｉｌｋ ｆｒｏｍ ｄａｉｒｙ ＣＯＷＳ ｗｉｈｔ ｃｈｒｏｎｉｃ ｓｕｂ－ｃｌｉｎｉｃａｌ ｍａｓｔｉｆｓ．ＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＲｅｓｅａｒｃｈ，２００５，３６：１９１—１９８． ， ［２４】Ｇｒｏｎｌｕｎｄ Ｕ，Ｈｕｌｔｅｎ Ｃ，Ｅｃｋｅｒｓａｉｌ Ｐ Ｄ，Ｈｏｇａｒｔｈ Ｃ，Ｐｅｒｓｓｏｎ Ｗａｌｌｅｒ Ｋ． Ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ ａｎｄ ｓｅｒｕｍ ａｍｙｌｏｉｄ Ａ ｉｎ ｍｉｌｋ ａｎｄ ｓｅｒｕｍ ｄｕｒｉｎｇ ａｃｕｔｅ ａｎｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｌｙ ｉｎｄｕｃｅｄ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｍａｓｉｔｆｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄａｉｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００３，７０：３７９—３８６． ［２５】Ｍａｉｆａ Ａ，Ｌａｎｎａｒｔ Ｂ．Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ ｉｎ ｂｏｖｉｎｅ ｉｍｌｋ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄａｉｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００６，７３：２９９—３０５． ［２６］Ｎｉｅｌｓｅｎ ＢＨ，Ｊａｃｏｂｓｅｎ Ｓ，Ａｎｄｅｒｓｅｎ ＥＨ，Ｎｉｅｗｏｌｄ ＴＡ，Ｈｅｅｇａａｒｄ ＰＭＨ． Ａｃｕｔｅ ｐｈａｓｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｃｅｎ￣ａｆｉｏｎ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｍｉｌｋ ｆｒｏｍ ｈｅａｌｈｔｙ ＣＯＷＳ， ＣＯＷＳ ｗｉｔｈ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｍａｓｔｉｆｓ ａｎｄ ＣＯＷＳ ｗｉｈｔ ｅｘｔｒａｍａｍｍａｒｙ ｉｎｉｎｆｉａｍｍａｔｏｒｙ ｃｏｎｄｉｉｔｏｎｓ．Ｔｈｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｒｅｃｏｒｄ，２００４，１５４：３６１—３６５． （收稿日期：２０１１－０５—１６） ８３
