组培实习⼼得
组培实习⼼得
组培实习给了我们⼀次接近⼤⾃然的机会让我感受到⾃然之伟⼤。下⾯⼩编为⼤家带来组培实习⼼得的内容，希望⼤家喜欢。
篇⼀：组培实习⼼得
⼀、前⾔
(1)植物组织培养是指在⽆菌和⼈⼯控制的环境条件下，利⽤适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原⽣质体进⾏培养，使其再⽣细胞或完整植株的技术。该技术能应⽤于植物离体快繁、⽆病毒苗⽊培育、培育新品种或创制新物种、次⽣代谢产物⽣产、植物种质资源的离体保存、⼈⼯种⼦等。⽽组织培养的实习能够将课本中所学的理论知识应⽤于实践，开拓我们的视野，扩⼤我们的知识⾯，对于提⾼我们的探究意识和创新、动⼿操作能⼒具有很重要的意义。
(2)植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础，是指每⼀个植物细胞带有该植物的全部遗传信息，在适当的条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型的细胞，形成不同类型的器官甚⾄胚状体，直⾄形成完整再⽣植株。
(3)茅膏菜具有较⼤的药⽤价值和研究价值但种⼦萌发率低，因此可利⽤种⼦繁殖获得⽆菌苗后在进⾏快繁。 ⼆、实习项⽬ 茅膏菜的组织培养 三、实习⽬的
(1)复习、巩固和植物组织培养的基本理论和基本知识，同时进⼀步丰富所学知识;
(2)了解茅膏菜的形态、习性、种类、⽤途的多样性以及它们与环境的关系，激发学习的积极性; (3)理论联系实际，通过⾃主学习和研究性学习培养独⽴⼯作能⼒和创新意识; (4)重点掌握茅膏菜组织培养的基本操作技术及⽅法; 四、实习时间安排：
(1)2012-11-18、2012-11-24、2012-11-25在图书馆查阅茅膏菜及组织培养的相关资料; (2)2012-12-1⾄2012-12-2去奇正藏药⼚药材种植基地参观，采集茅膏菜种⼦; (3)2012-12-8⾄2012-12-13在植物组织培养实验室进⾏茅膏菜的快速繁殖实验; (4)2012-12-14⾄2012-12-16撰写实习报告; 五、实习地点
(1)农牧学院图书馆、电⼦阅览室
(2)奇正藏药⼚药材种植基地(奇正藏药⼚药材种植基地位于林芝地区，全地区海拔500⾄7800多⽶，特殊的地形和⽓候，使这⾥各种物种资源⼗分丰富，⽽且没有受过污染。该种植基地⽬前已成功种植⾼⼭红牡丹、茅膏菜、波棱⽠、翼⾸草、独⼀味、藏⿇黄等多种药⽤植物)
(3)农牧学院植物组织培养实验室(植物组织培养实验室具有进⾏该项技术的完整设备和条件 ，便于进⾏茅膏菜的组织培养)
六、实习材料及⼯具：⾃封袋 、采集箱 、三⾓纸袋 、⾼压灭菌锅、超净⼯作台、烧杯、镊⼦、剪⼑、培养⽫、三⾓瓶、酒精灯 、医⽤
脱脂棉、培养架、医⽤⼩推车、蛭⽯、河沙、园⼟、泥炭⼟、育苗盘、喷雾器、配制MS培养基所需母液、75%酒精、70%酒精、0.1%升汞、NAA、6-BA、甲醛、⾼锰酸钾、0.1%多菌灵、活性炭、茅膏菜种⼦ 七、实习内容 (1)查阅资料
借助图书馆，电⼦阅览室查阅关于茅膏菜的⽣长习性，和其组织培养相关知识为实习提供技术⽀撑。
茅膏菜：【别名】⽯龙芽草、⼭胡椒、胡椒草、夏⽆踪、⽩花叶、黄⾦丝、滴⽔不⼲、⼭地⽪、捕⾍草、⾷⾍草、柔鱼草、苍蝇草、捕蝇草、苍蝇⽹、珍珠草、露珠草、⽆风⾃动草。为茅膏菜科植物茅膏菜或光萼茅膏菜的全草。多年⽣草本，直⽴或有时呈攀援状，⾼9-32cm，有紫红⾊汁液。鳞茎状球茎紫⾊，直径约6mm。基⽣叶密集成近⼀轮或最上⼏⽚着⽣于节间伸长的茎上;退化基⽣叶线状钻形，长约2mm;不退化基⽣叶圆形或扁圆形，花时枯凋;茎⽣叶互⽣，盾状，半⽉形或半圆形，长2-3mm，边缘或叶上⾯有多数头状腺⽑，分泌粘液，形成露珠状。茅膏菜属植物叶⾯密被分泌黏液的腺⽑，当昆⾍停落在叶⾯时，即被黏液粘住，⽽腺⽑⼜极敏感，有物触及，便会向内和向下运动，将昆⾍紧压于叶⾯。当昆⾍逐渐被腺⽑分泌的蛋⽩质分解酶所消化后，腺⽑重新张开再次分泌黏液，故能常在叶⽚上见到昆⾍的躯壳。这类植物本⾝有叶绿素，可以进⾏光合作⽤，但根系极不发达，因此靠捕⾷昆⾍就能弥补其氮素养分的不⾜。
该植物全草含矶松素、茅膏醌、羟萘醌、氢化萘醌等多种醌类成分。腺⽑分泌物含类似胰酶的蛋⽩酶。可⽤于治疗疮毒、瘰病。治胃痛，⾚⽩痢，⼩⼉疳积，跌打损伤。
⽣态环境：1.⽣于海拔1200-3650m的⼭坡潮湿地的松林下、草丛中或溪沟边。⒉⽣于⼭坡、溪边草丛、灌丛和疏林下。分布：⒈分布于四川、贵州、云南和。⒉分布于江苏、安徽、浙江、江西、福建、、湖北、湖南、⼴东、海南、⼴西等地。
茅膏菜萌发培养基为：1/2MS培养基(pH=5.8)，增殖培养基为1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1，⽣根培养基为1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2 (2)采集茅膏菜种⼦
采集地点：奇正藏药⼚药材种植基地 采集时间：2012-12-1上午 (3)培养基的配制
按照MS培养基的扩⼤倍数配制所需培养基，待完全溶解后导⼊三⾓瓶中，⽤封⼝膜封好，放⼊⾼压灭菌锅中121℃，灭菌20min后取出培养基冷却⾄凝固。 (4)茅膏菜⽆菌苗的获得
先打开超净⼯作台上的紫外灯，⽤紫外线灭菌30min，然后将其关闭。
第⼀步：⽤滤纸将茅膏菜的种⼦包好，并⽤绳⼦进⾏捆扎。 第⼆步：先打开超净⼯作台上的紫外灯，⽤紫外线灭菌30min，
然后将其关闭。 第三步：⽤⾃来⽔清洗双⼿后，在超净⼯作台上点燃酒精灯后将双⼿及⼩臂⽤75%酒精擦拭。将捆扎好的种⼦⽤70%酒精消毒30s，然后⽤⽆菌⽔冲洗2-3次。
第四步：⽤0.1%的升汞将种⼦消毒12min，然后⽤⽆菌⽔冲洗5-6次。 第五步：⽤镊⼦将绳⼦解开，将种⼦放⼊垫有滤纸的`培养⽫中吸取种⼦表⾯的液体。然后将种⼦点接在1/2MS培养基(pH=5.8)表⾯。 第六步：将接种好的种⼦封好，放置在培养架上光照3000-4000LX，室温培养,30d。 (2)茅膏菜的增殖培养
将茅膏菜萌发出的⽆菌苗在超净⼯作台上剪去根，接种到增殖培养基1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1，放置培养架上室温，光照3000-4000LX培养40d。 (5)茅膏菜的⽣根培养
增殖40d后，把茅膏菜适当⾼度的芽(3-4cm)在超净⼯作台上接种到1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2,进⾏⽣根培养，并观察
记录⽣根率。结果：⽣根率为85%。 (6)⽣根苗的驯化
将培养瓶放在温室⾃然光照下培养，同时昼夜有明显温差，5-7d后再打开封⼝膜使瓶中温度降低，通⽓加强，2-3d后可移苗。
(7)⽣根苗的移栽
第⼀步：移栽基质的准备。将河沙：园⼟：泥炭⼟：(1:1：2)
和蛭⽯搅拌均匀。⽤甲醛和⾼锰酸钾进⾏熏蒸消毒并密封，3d后打开取出基质在阳光下暴晒，再装⼊育苗盘中。 第⼆步：幼苗出瓶后，先洗去粘附的培养基，⽤0.1%多菌灵溶液浸泡后移栽于基质中，种植密度为2-3cm×4-6cm。移栽完后⼀次性浇透⽔，并⽤0.1%多菌灵喷雾。当叶表⾯⽔珠消失后盖好保温薄膜，保持温度15-25℃，湿度在85%以上，同时注意通风，控制光照50%左右，每7-10d喷⼀次杀菌剂。
第三步：待⼩苗成活并长新，稍后可施稀薄的MS培养液作追肥，逐渐增强通风直⾄约2周后打开保湿薄膜即可，并统计移栽成活率。结果：移栽成活率为30%。
由此看出，茅膏菜移栽成活率较低，其原因分析有以下⼏点：(1)当前温度较低不利于茅膏菜的移栽(2)幼苗⽔分供需不平衡(3)试管苗⽼化(4)移栽过程中微⽣物感染(4)试管苗的健壮性差(5)过渡培养的环境条件不利于试管苗的⽣长 ⼋、实习⼼得
(1)通过本次实习让我了解了更多关于茅膏菜的知识，基本掌握了进⾏茅膏菜组织培养的内容、步骤以及应该注意的问题，开拓了我的视野，在⼀定程度上提⾼了我的动⼿实践能⼒和操作技能。同时也让我对课本专业知识理解的更加深刻。 (2)实习中我也掌握了超净⼯作台、⾼压灭菌锅等仪器的使⽤及注意事项，同时也掌握了配制培养基的⽅法。 (3)通过去奇正藏药⼚药材种植基地采集种⼦和管理员的介绍我学
到了关于独⼀味、翼⾸草、藏⿇黄等藏药材知识，丰富了我的知识⾯，增进了我对藏药材的理解，提⾼了我对本专业的学习兴趣和探究意识。
(4)这次实习也增进了我们班级同学之间的了解，加强了我们同学和⽼师之间的友谊，增强了班级的团结⼒和凝聚⼒ 。 (5)本次实习给了我们⼀次接近⼤⾃然的机会让我感受到⾃然之伟⼤，她留给我们如此多的宝贵财富，等待我们去发掘，去保护，去利⽤，我们再开发其研究价值的同时更应该懂得怎样以⼩代价换取⼤创造。
篇⼆：组培实习⼼得
本次实习，我接触到向往已久的组织培养技术，原本认为很⾼⼤上的技术，在⽼师的细⼼指导下也逐渐掌握要领。这次，我们进⾏了⿇⽵初代繁殖体系的建⽴和容器苗的移植两项重要的⼯作。实验的过程很繁琐，每⼀步都⾄关重要，每⼀步都需要我们付出⼗⼆分的细⼼和耐⼼才能获得最后的成功。
在配置培养基时，需要加⼊的母液种类繁多，我们的细⼼远远不够，每加⼊⼀种母液就核对⼀种母液的细⼼制度让我们深深折服。另外，培养基的灭菌⾄关重要，这决定了之后⼯作的绝对成败。通过，配置培养基这⼀基本但是⾄关重要的⼯作，我们学会了付出细⼼，⽤耐⼼收获成果。
另外，理论与实践是不可分割的，在理论学习的同时，我们还需要认真的进⾏实验。在现代农业中，组织培养有着极其重要的作⽤，因此更需要我们在实验中认真的学习组培的技术。 根据细胞的全能性原理以及组培原理将离体的植物器官原⽣质体培养在⼈⼯配制的培养基中，给与适当的条件，使其长成⼈类所需要的组织、器官和完整的植株的过程。⽽⾃然下的植株是含有病毒的，这样会导致经济作物⼤量减产，为了克服这⼀困难在组织培养前对外植体进⾏脱毒，这不仅克服了经济作物的减产还提⾼了产量，⼤⼤提⾼了经济效益。并切植物组织培养实现了⾼价植物种类的⼯⼚化⽣产，为这些紧缺植物和植物体内各物质特别是次⽣代谢物的提取提供了更多的材料。
在本次实验中，我发现⾃⾝在做实验时还存在很多的不⾜，在理论知识⽅⾯也有很多的⽋缺。这就要求我在以后的学习中，更加努⼒认真。同时也感谢团队同学的包容与互助以及⽼师的指导和教导。
