中国药物与临床２００９年４月第９卷第４期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ａｐｒｉｌ ２００９，Ｖｏ１．９，Ｎｏ．４ ・ ３１ｌ ・ 死细胞数大于实验组的凋亡坏死细胞。分析原因，可能是活 体取脑过程中，损伤了部分脑组织所致；也可能部分动物血 管解剖变异，代偿充分所致，在分析数据时，应区别对待，采 取适当方法予以控制。 需要指出的是颈动脉处病变致脑供血不足是多方面因 素共同作用的结果。颈动脉狭窄只是其中的一个方面，事实 上对于缺血性脑血管病的发生，颈动脉粥样斑块的形成和脱 落也是重要的原因。本实验采取的是急性造模的方式，对慢 性粥样斑块的形成过程及影响未作过多探讨，只是单纯地研 究了不同颈动脉狭窄程度下，脑动脉终末支的血流动力学变 化。对于两方面相互之间的协同作用，应在后续的实验中进 一本实验发现当单侧颈动脉狭窄程度达到７０％以上时，颈 动脉部的血流动力学指标开始出现显著异常，但颅内动脉的 终末支血流动力学指标尚未出现显著变化，分析原因可能是 由于颅内动脉系统调节代偿机制所致。当单侧颈动脉狭窄程 度达到８０％以上时．颈动脉部的血流动力学指标仍表现显著 异常，颅内动脉的终末支的血流动力学指标开始出现显著异 步研究探讨。 参考文献 １ 姚谦．脑缺氧症的基础与临床．合肥：安徽科学出版社，１９９０． 常，同时流式细胞术检测脑组织凋亡，坏死细胞数也开始出 现显著异常。本实验显示７０％～８０％的这个狭窄区间是弓ｌ起脑 血流显著变化的动脉狭窄的临界区间，大于此区间时，部分 样本脑皮层细胞则开始进入凋亡坏死阶段。在临床工作中， 依据此标准．运用超声筛查患者．及时施加干预措施．以防止 脑缺血的进一步发展是适宜的。 ２ 徐欣．体表超声检测颈动脉粥样硬化与冠心病相关性研究进展． 心血管病学进展，２００３，２４（４）：３０６—３０９． ３ 张屹辉，任卫东．唐力．颈动脉狭窄致兔脑缺血时的眼动脉血流 动力学改变．中华超声影像学杂志，２００２，ｌ１（５）：３００—３０３． （收稿日期：２００８—０７—３０） 慢性肾衰竭大鼠瘦素与心肌肌钙蛋白Ｉ相关因素探讨 杨光辉郭瑜玲 目前瘦素对慢性肾衰竭（ＣＲＦ）心肌是否损伤，瘦素与心 肌肌钙蛋白｜（ｃＴｎＩ）的相关性如何，国内外尚未见明确报道。 本研究观察了５／６肾大切ＣＲＦ大鼠瘦素和ｃＴｎＩ的变化情况， 并在骨化三醇干预治疗下，分析二者的相关因素。为及早诊 治ＣＲＦ心肌损伤提供理论依据。 １材料与方法 １．１材料 分离肾周脂肪组织，不行肾脏切除。每次手术缝合前均给予 青霉素ｌＯ万ｕ，只腹腔内注射预防感染。模型建立后，治疗组 每日骨化三醇胶丸（２０ ｇ，１００ ｇ体质量）溶于香油中灌胃，模 型组及对照组每日等量香油灌胃，持续４５ ｄ。 １．２．２标本采集与检测：两次手术后第１、４、８周采血测定大 鼠肾功能［血肌肝（Ｓｃｒ）、尿素氮（ＢＵＮ）］，以确定模型是否成 功。模型建立后，分别于第１、１５、３０、４５天鼠尾采血测定肾功 能，于第１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５天测定血清瘦素和 ｃＴｎＩ，以观察各指标的动态变化。肾功能采用全自动多功能生 化分析仪测定．瘦素和ｃＴｎＩ均采用ＥＬＩＳＡ试剂盒测定。 １．３统计学分析 ． 采用ＳＰＳＳ１ １．５软件包进行统计学处理。数据均为计量资 料，以互虹表示，采用重复测量的方差分析，两两比较采用 ＳＮＫ－ｑ检验。瘦素和ｃＴｎＩ、瘦素和肾功能分析均采用Ｐｅａｒｓｏｎ 清洁级雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４８只，体质量１８０—２２０ ｇ．购于 山西医科大学生理教研室。随机分为３组：健康组（１２只）、假 手术组（１２只）、手术组（２４只）。用Ｐｌａｔｔ法…建立ＣＲＦ大鼠模 型；模型建立后，假手术组８只大鼠作为对照组，将ＣＲＦ模型 大鼠１６只随机分为模型组（８只）和治疗组（８只）。 主要试剂及仪器：ｃＴｎＩ及瘦素的酶联免疫吸附试验 （ＥＬＩＳＡ）试剂盒均购于上海轩昊生物工程有限公司。骨化三 醇胶丸购于上海罗氏制药有限公司，０．２５ 片。７２０全自动 直线相关分析，计算相关系数ｒ值。Ｐ＜０．０５认为差异有统计学 意义。 ２结 果 多功能生化分析仪由山西医科大学微生物学与免疫学教研 室提供。 １．２方法 ２．１ ＣＲＦ模型建立 １．２．１ ＣＲＦ大鼠模型的制备：手术组：ｌｏ％水合氯醛０３ ｍＹｌ００ ｇ 腹腔注射麻醉，暴露背部左肾区。经后腹膜暴露肾脏，分离左 肾，行左肾上下极切除约２／３，１周后行右肾全摘除。两次手术 ２．１．１肾功能变化：正常大鼠肾功能（正常参考值：Ｓｃｒ １７．６８～ ７Ｏ．７２ ｍｏｌ／Ｌ；ＢＵＮ ５．５５—７．７７ ｍｍｏｌ／Ｌ）。术后８周手术组ＢＵＮ、 Ｓｃｒ均达到Ｗｉｓｔａｒ大鼠ＣＲＦ诊断标准『Ｓｃｒ￣＞１４ ｍｓ／Ｌ（１２３．８ 共切除肾脏的５／６左右。假手术组：具体方法同手术组。但仅 作者单位：０３０００１太原，山西医科大学（杨光辉）；山西医科大学 第一医院血液净化中心（郭瑜玲） ｍｏＹＬ）；ＢＵＮ＞￣２４ ｍｓＩＬ（８，５ ｍｍｏｌ／Ｌ）］ｃ２］，经重复测量方差分析 结果显示，手术组与假手术组肾功能Ｓｃｒ、ＢＵＮ比较差异均有 统计学意义（Ｆ＝３８１．５９７，Ｐ＜０．０５：Ｆ＝１５１．３６５，Ｐ＜０．０５），见表１。 ・ ３１２ ・ 中国药物与临床２００９年４月第９卷第４期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ａｐｒｉｌ ２００９，Ｖｏ１．９，Ｎｏ．４ 表】各组大鼠不同时间肾功能的变化（ｉ ） ２．２．２瘦素和ｃＴｎＩ变化：经重复测量的方差分析，结果显示 模型组和治疗组大鼠的瘦素、ｃＴｎＩ差异均有统计学意义（ １７８．２１ １，Ｐ＜０．０１；Ｆ＝２１４．２７１，，。ｎ．０１） 见表４。随着治疗时间 的延长，模型组瘦素水平逐渐升高，治疗组瘦素水平总体呈 下降趋势，后期略一Ｉ－升，但低于治疗前水平（Ｐ＜Ｏ．０５），同时均 低于同时间点模型组大鼠瘦素值：随着治疗时间的延长，模 注：ａ与相同时间点假手术组比较Ｐ＜Ｏ．０５ 型组ｃＴｎＩ值逐渐升高。治疗组呈下降趋势，且均低于同时间 ２．１．２苏木素一伊红（ＨＥ）染色光镜观察：健康组和假手术组 为肾脏正常结构。手术组：肾脏组织较正常组疏松，肾小球基 底膜增厚．小球内细胞增多，球囊腔狭窄。肾小球局灶节段性 点模型组大鼠 ２．２．３瘦素与Ｓｃｒ、ＢＵＮ及ｃＴｎＩ相关性分析：对模型组和治 疗组两组大鼠各指标进行ｐｅａｒｓｏｎ直线相关分析，结果显示： 玻璃样变性。肾小管灶状萎缩与高度扩张同时存在，肾间质 有大量炎症细胞浸润。 瘦素、Ｓｃｒ、ＢＵＮ、ｃＴｎＩ均呈正相关［ｒｆ ． ）＝０．４７１，Ｐ＜０．０１；ｒ（Ｂ ， ｌｅｐｔｉｎ ０．４９１，Ｐ＜Ｏ．Ｏ１； （１神 ．）＝０．９１２，Ｐ＜０．０１］。对模型组和治疗 ）：０．６５３，Ｐ＜Ｏ．０１］。 ２．２相关指标分析 ２．２．１体质量及肾功能变化：经重复测量的方差分析，结果显 示３组大鼠的体质量、肾功能Ｓｃｒ、ＢＵＮ差异均有统计学意义 （ ５０４．５９５．Ｐ＜Ｏ．Ｏ１；Ｆ＝６３４．７３３，Ｐ＜Ｏ．Ｏ１； ｌ８５．２７６，Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）。 组瘦素与ｃＴｎ１分别作相关分析，二者均呈正相关［ｒ １羹驯 ． ） ＝０．７９７，Ｐ＜Ｏ．０１； 疗（蛐． ３讨 论 肾脏是循环血中瘦素清除的主要部位。对大鼠及人类的 研究表明［３］：瘦素是以原型形式从肾小球滤过，由肾小管上皮 用ＳＮＫ—ｑ检验进一步进行两两比较，随着给药时间的延长， 模型组大鼠体质量逐渐下降，而治疗组大鼠体质量逐渐上 细胞摄取并代谢降解，降解产物从尿中排出。ＣＲＦ患者高瘦 素血症的原因主要是肾脏清除功能下降所致，其次是人体脂 肪增加及全身微炎症状态刺激瘦素产生增加＿４＿。本实验瘦素 与Ｓｃｒ、ＢＵＮ均呈成相关，说明尿毒症时瘦素的变化与肾功能 密切相关。 升，且均明显高于同时间点模型组大鼠体质量，模型组与治 疗组大鼠肾功能指标均逐渐升高，治疗组大鼠肾功能指标明 显低于同时间点模型组。见表２。３。 表２大鼠各组不同时问体质量变化（； ） ｇ 瘦素参与许多心脏疾病的发生发展 ：高瘦素血症是急 性心肌梗死发生的危险因素，在急性心肌梗死患者心肌 损伤的发展中具有一定的调节作用。Ｐｕｉｄｈａｍ和Ｚｏｕ Ｅ 总结所 有瘦素对心脏影响的文献并进行了实验研究，提出心脏上有 注：ａ与相同时间点对照组比较Ｐ＜０．０５； 与相同时间点模型组比 较Ｐ＜０．０５ 瘦素受体存在，心脏是瘦索作用的靶器官，瘦素通过旁分泌 和自分泌的方式调节心脏。ｃＴｎＩ是心肌损伤的特异性标志 表３大鼠各组不同时间点肾功能变化（； ） 注：ａ与相同时间点模型组比较Ｐ＜０．０５ 物，正常人血清中几乎测不到 。已证实当心肌细胞缺血、缺 氧而发生变性坏死时，ｃＴｎＩ释放入血，并有持久的动态消长 外报道结论不一。我们动态观察ＣＲＦ大鼠ｃＴｎＩ浓度的变化： 随着。肾功能的恶化，ｃＴｎＩ呈逐渐升高的趋势，提示血清ｃＴｎＩ 过程。ＣＲＦ导致心肌损伤时是否也存在ｃＴｎＩ的异常表达，国 升高可能是由于心肌细胞损伤引起。模型组慢性肾衰竭大鼠 中国曲物与临床２００９年４月第９卷第４期Ｃｈｉｎｅ￣Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ａｐｒｉｌ ２００９，Ｖｏ１．９，Ｎｏ．４ ・ ３ｌ３ ・ 瘦素水平和ｃＴｎｌ均随术后时间的延长呈上升趋势，且二者 有直线相关关系（ｒ＝０．７９７，Ｐ＜０．０１）。说明在慢性肾功能衰竭 参考文献 １ 王小兵．周富华．肾大部切除制作慢性肾衰大鼠模型．医学理论 与实践，２００３，１６（１２）：ｌ３６７—１３６８． 发病过程中。瘦素可能通过其在心肌上的受体造成心肌损 伤。 ２ 石纪才，夏晓红，申玉学，等．复肾汤治疗慢性肾功能衰竭的实 验研究．河北中医，１９９４，１７（６）：１． ３ Ｓｈａｒｍａ Ｋ，Ｃｏｎｓｉｄｎｅ ＲＶ．Ｔｈｅ ＯＢｐｒｏｔｅｉｎ（１ｅｐｔｉｎ）ａｎｄ ｔｈｅ ｋｉｄｎｅｙ． Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ，１９９８，５３：１４８３—１４８７． 骨化三醇是近年来颇受关注的维生素Ｄ 的活性代谢产 物，不仅与甲状旁腺激素共同调节机体钙平衡，还具有神经保 护、免疫调节及细胞增殖等多种效应．且其作用与细胞的 种类、状态以及药物的浓度密切相关 。在心血管系统中的影 响及其机制尚不明确。文献『９１报道显示肾功能衰竭患者给予 骨化三醇可改善心功能，但其机制不明。有研究表明ｆｌｏ］，骨化 三醇可能通过对炎症介质的免疫调节减轻大鼠脑缺血一再灌 注性损伤。本实验显示：治疗组瘦素水平整体呈下降趋势，后 期略上升，但低于治疗前水平。推测其可能机制为病变初期 骨化三醇通过免疫调节减轻机体微炎症状态．从而减少因炎 症刺激造成的瘦素生成增加，使瘦索水平下降，但随着肾小 球滤过率进一步下降，经肾排泄瘦素进一步减少，从而造成 ４ 李宓，杜艺，郑晶，等．慢性肾衰病人高瘦素血症、残余肾功能、 体脂及炎症的相关性分析．国际泌尿系统杂志，２００６，２６（１）： ４－７． ５ Ｆｕｊｉｍａｋｉ Ｓ，Ｋａｎｄａ Ｔ，ｒｕｊｉｔ￣Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｐｌａｓｍａｌｅｐｔｉｎ ａｃｕｔｅ ｍｙｏｅａｒ－ ｄｉａｌ ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ ｏｆ ｍｅａｓｕｒ ｉｎ ｇｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．Ｊ Ｉｎｔ Ｍｅｄ Ｒｅｓ． ２００１，２９（２）：１０８－１ １３． ６ Ｐｕｒｄｈａｍ ＤＭ，Ｚｏｕ ＭＸ．Ｒａｔ ｈｅａｒｔ ｉｓ ａ ｓｉｔｅ ｏｆ ｌｅｐｔｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｃｔｉｏｎ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｈｅａｒｔ Ｃｉｒｅ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００４，２８７：２８７７— ２８８４． ７ 陈献广，吴华，毛永辉，等．维持性血液透析患者血清心肌肌钙 蛋白Ｔ和ｃ反应蛋白水平与预后的关系．中华肾脏病杂志。 ２０ｏ６．２２（３）：１６１—１６５． ８ Ｐｉｌｌａｉ Ｓ，Ｂｉｒｌｋｅ ＤＤ，Ｓｕ Ｍ－Ｊ，ｅｔ ａ１．１，２５ Ｄｉｈｙｄｍｘｙｖｉｔａｍｉｎ Ｄ３ ｕｐ－ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙ １－ｉｎｏｓｉｔｏｌ ｓｉｎａｌｉｇｎｇ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｈｕｍａｎ 瘦素水平有所上升，但其最高值仍低于治疗前值，且二者差 异有统计学意义。治疗组随着治疗时问的延长，ｃＴｎＩ呈下降 趋势，且治疗组瘦素与ｃＴｎｌ成直线正相关，说明骨化三醇对 慢性肾衰竭大鼠心肌损伤有保护作用，其机制可能与降低瘦 素水平有关。提示骨化ｊ醇对慢性肾衰竭大鼠瘦素水平降低 有一定的作用。 ９ ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ ｂｙ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｐｈｏｓｏｌｉｐａｓｅ Ｃ ｌｅｖｅ１．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ。 １９９５，９６：６０２－６０７． Ｃｈｅｏｌ ＷＰ，Ｙｏｎｇ Ｓｏ，Ｙｏｕｎｇ ＳＳ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｒｎｖｅｎｏｕｓ ｃａｌｃｉｔｉｏｌｆ ｒｅ— ｇｒｅｓｓｅｓ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ ｉｎ ｈｅｍｏｄｉｌｙｓｉａｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｓｅｃ— 综上所述，我们认为ＣＲＦ大鼠高瘦素血症与肾功能的降 低密切相关。ｃＴｎｌ是反映ＣＲＦ大鼠心肌损害的早期指标。高 瘦素血症可造成心肌损伤．还可能与全身的微炎症状态有 关，使血清ｃＴｎＩ升高。其机制有待于进一步探讨 骨化一ｉ醇可 能通过改善尿毒症时全身的微炎症状态而降低瘦素水平．减 轻瘦素对心肌的损伤，对慢性肾功能衰竭大鼠心肌损伤有保 护作用。因此，治疗高瘦素血症可降低心血管并发症 ｏｎｄａｒｙ ｈｙｐｅｒｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｉｓｍ．Ａｍ Ｊ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓ，１９９９，３３（１）：７３． １０ 李薇，陈光辉，吴波，等．骨化三醇对大鼠局灶性脑缺血——再 灌注神经保护作用的研究．中国脑血管病杂志，２００６，３（７）： ３１２—３ｌ６． （收稿日期：２００８一ｌｌ一０４） 幽门螺杆菌对胃上皮细胞凋亡及ｐ２７ 表达的影响 哈斯朝鲁王健郝素珍姚红赵振祥高瑞红 凋亡是一种基因的程序性细胞死亡，正常情况下它 降或缺失时，Ｇ ／Ｓ期的转换出现紊乱。导致细胞异常增殖。本 与增殖一起维持人体细胞总数的相对恒定。细胞周期点 是将细胞增殖和凋亡连在一起的枢纽，是控制细胞增殖与凋 亡的双向开关。ｐ２７ｋ￣ （ｐＺ７一ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎ １）基因是 研究通过选用幽门螺杆菌（Ｈｐ）ｌ型菌株感染人胃腺癌上皮 细胞株ＳＧＣ～７９０１建立体外Ｈｐ感染细胞模型，检测感染细 胞的凋亡率和细胞周期抑制因子ｐ２７ 及其ｍＲＮＡ的表达， 探讨不同浓度Ｈｐ对感染细胞凋亡及ｐ２７ 表达的影响，为深 入了解Ｈｐ相关性胃癌的发生发展提供实验依据。 １材料和方法 Ｐｏｌｙｋａ等Ｈ］于１９９４年发现的新的ＣＫＩ基因．具有性调节 细胞周期进程的作用，这一作用主要通过抑制Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ— ＣＤＫ２和Ｃ￣ｃｌｉｎＤ—ＣＤＫ４等Ｇ 期激酶复合物，Ｇ．／Ｓ期的 转换，使突变细胞不能通过Ｇ 期来实现的。当ｐ２７ 表达下 作者单位：０３０００１太原，山西医科大学第一医院检验科（哈斯朝 鲁）；山西医科大学微生物与免疫学教研室（王健、郝素珍、姚红、赵振 祥、高瑞红） １．１材料 幽门螺杆菌国际标准产毒株（Ｃａ ＋、ＶａｃＡ＊）ＮＣＴＣ１１６３７， 由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提供。胃腺癌上 皮细胞系ＳＧＣ一７９０１，购自中国科学院细胞生物学研究所；
