生物指示剂
LT
另外根据客户要求可提供：生孢梭菌（Clostridium sporogenes），枯草芽孢杆菌（B. subtilis），巨大芽孢杆菌（B. megaterium），蜡状芽孢杆菌（B. cereus）等的芽孢悬液。
2.工业生物指示剂
工业生物指示剂是根据工业企业实际情况，按照标准要求定制加工而成，以满足企业的特殊需求，通常采用不同的载体材料和包装形式，例如钢片、钢线、纸片、棉线、塑料片和滑石粉等，它与芽孢条、自含式等标准生物指示剂相比更具优势。CICC可按照客户要求提供定制工业生物指示剂。 染菌滑石粉
CICC研制的标准专用染菌滑石粉，以符合标准要求的滑石粉为载体，选用CICC自行生产的微生物材料萎缩芽孢杆菌ATCC 9372芽孢悬液，按标准要求精制而成，每批染菌滑石粉产品均经过芽孢含量检验，确保质量稳定。
该产品适用于评定屏障材料对携菌微粒阻穿透性的实验方法，适用于国家医药行业手术衣标准《病人、医护人员和器械用手术单、手术衣和洁净服》（YY/T 0506-2009）、国际标准ISO 22612:2005 Clothing for protection against infectious agents -- Test method for resistance to dry microbial penetration（传染介质防护服--防干微生物渗入的试验方法）。 产品参数： 产品名称 染菌滑石粉 微生物材料 萎缩芽孢杆菌（B. atrophaeus）ATCC 9372芽孢 含量 规格 粒度 贮藏条件 有效期 108 CFU/g 0.5g+0.1 g /瓶 ＜800目（95%＜15μm） 2~8℃，避免阳光直射和接触灭菌剂。 生产日起12个月
染菌石英粉
CICC研制的标准专用染菌石英粉，以符合标准要求的石英粉为载体，选用CICC自行生产的微生物材料萎缩芽孢杆菌ATCC 9372芽孢悬液，按标准要求精制而成，每批染菌石英粉产品均经过芽孢含量检验，产品质量稳定。该产品适用于评定干性条件下屏障材料对微生物屏障性能。 产品参数： 产品名称 染菌石英粉 微生物材料 萎缩芽孢杆菌（B. atrophaeus）ATCC 9372芽孢 含量 规格 粒度 贮藏条件 有效期 106 CFU/g 0.25g+0.01 g /瓶 0.04mm～0.15mm 2~8℃，避免阳光直射和接触灭菌剂。 生产日起12个月
其它产品
工业生物指示剂还包括以不同规格钢片、钢丝、纸片、棉线、塑料片等进行定制加工的产品。 SGM公司产品参数
菌种 Bacillus atrophaeus Bacillus pumilus 载体 纸条 规格（大小） 3×mm 2×10mm 2×19mm 1×25mm 6×6mm 编号 Bacillus atrophaeus Bacillus pumilus 纸片 6mm G. stearothermophilus 不锈钢片 G. stearothermophilus 不锈钢丝 Bacillus atrophaeus G. stearothermophilus 棉线 8mm 100% cotton, 3/4\" long
3.芽孢条生物指示剂
芽孢条生物指示剂是一种纸条生物指示剂，用于监控蒸汽、低温甲醛蒸汽、环氧乙烷、干热和γ射线工业灭菌过程。 SGM 产品用菌种 产品规格（浓产品包装 度） 100 培养条件 编号 G. stearothermophilus 105 55-60°C，7 D 1.
106 B. atrophaeus B. pumilus 106 106 107 108 RAVEN 产品用菌种 100 100 100 100 100 55-60°C，7 D 30-35°C，7 D 30-35°C，7 D 30-35°C，7 D 30-35°C，7 D 1. 1. 1. 1. 1. 产品规格（浓产品包装 度） 100 100 100 100 培养条件 编号 G. stearothermophilus 105 106 B. atrophaeus B. pumilus 四环 产品用菌种 106 106 55-60°C，7 D 55-60°C，7 D 30-35°C，7 D 30-35°C，7 D 1. 1. 1. 1. 产品规格（浓产品包装 度） 培养条件 编号 G. 5.0×105～50 6stearothermophilus 5.0×10 ATCC 7953 B. atrophaeus 5.0×105～65.0×10 50 56°C，72h 1. 37 °C，7 D 1. 使用方法：
（1）将芽孢条放置于产品内部、产品包装和灭菌最难达到的位置。
（2）负载灭菌放置足够数量的芽孢条。注：根据规程要求不少于2个，通常每个循环建议10个。
（3）负载暴露于灭菌循环。
（4）负载冷却后及时移走芽孢条生物指示剂，并将其暴露于空气中。 （5）实验室转接芽孢条培养。
（6）采用严格的无菌操作技术，将每个生物指示条转接至斜面培养基。 （7）选择合适的培养温度培养7天。
（8）如果芽孢经灭菌循环存活，培养基混浊不透明。注：显微镜验证所有的阳性菌株是否革兰氏阳性，以及芽孢形成情况。 （9）记录试验结果。
（10）所有阳性样品需经高压蒸汽灭菌处理。 贮存条件室温 保质期12-24个月
品质保证芽孢条生物指示剂的菌种来源于公认的菌种保藏机构，芽孢数量、D值和Z值均经过验证。 4.自含式生物指示剂
自含式生物指示剂是一种带培养液的生物指示剂，根据其构造的不同可分为两类，一类是将菌片与装有培养液的小玻璃安瓿同放在一塑料软管中，软管顶端有滤纸封好的通气孔，灭菌后压碎安瓿，培养液与菌片混合之后培养观察；另一类是将培养液与细菌芽孢一同封于小玻璃安瓿中制成，灭菌后直接进行培养观察。不同类型的自含式生物指示剂适用于不同的灭菌方法、灭菌环境。自含式生物指示剂使用方便，具有无需无菌移种和无菌配制培养基、可避免假阳性结果、且培养时间短等优点，在医疗卫生及工业领域应用广泛。 SGM 包订检验监测种装培养条件 芽孢数量 单类 数号 量 100 105 蒸汽灭菌及快速蒸汽灭菌 106 25 105 106 100 100 25 100 图片 产品用菌种 Geobacillus 55-60°Cstearothermophilu培养24h s 过氧化氢灭菌
环氧丙烷灭菌 Bacillus atrophaeus 35-39°C环氧乙烷灭培养48h 菌 105 100 100 106 25 104 105 106 100 100 100 SterilAmpII 121℃工业Geobacillus 55-60°C蒸汽灭菌中stearothermophilu培养48h 小容器液体s 灭菌 110-118℃工业低温蒸37°C培 B. subtilis \"5230 汽灭菌中对养72h 小容器液体SterilAmpII \"523灭菌 0\" 对安瓿管中液体、大容Geobacillus 55-60°C器中液体、stearothermophilu培养48h 清洗消毒器s 中液体的蒸汽灭菌 Raven 106 100 105 50 MagnaAmp 106 50 图片 产品用菌种 包订检验监测种装培养条件 芽孢数量 单类 数号 量 35-39°C环氧乙烷灭培养48h 菌 100 106 25 105 100 Bacillus atrophaeus Geobacillus 55-60°C121℃蒸汽
ProTest stearothermophilu培养24h 灭菌、134℃s 快速蒸汽灭菌及预真空蒸汽灭菌 25 100 106 25 Bacillus atrophaeus 35-39°C环氧乙烷灭培养48h 菌 106 105 ProSpore2 105 110 Geobacillus 118-135°C55-60°Cstearothermophilu工业蒸汽灭培养48h s 菌 ProAMP 30支测试管 106 和1个压碎器 Geobacillus 55-60°Cstearothermophilu蒸汽灭菌 培养24h s 50 50 106 50 106 110 ProTest H2O2 Geobacillus 工业55-60°CstearothermophiluSTERRAD®灭培养24h s 菌系统
产芽孢检验监测种品数量 培养条件 类 规格 包订装单数号 量 50 10 10 4ml 105 10 106 50 Geobacillus 55-60°C121℃蒸汽stearothermophilu培养48h 灭菌 s 1ml 10 15 100 10 15 3M 包订检验监测种装培养条件 芽孢数量 单类 数号 量 55-60°C121°C压－ 100 654图片 产品用菌种 50 100 10 15 100 4ProSpore Ampoule 图片 产品用菌种 Geobacillus
Attest 1262 /1262P stearothermophilu培养48h 力蒸汽灭s 菌、132°C真空蒸汽灭菌 50 100 121°C蒸Attest™ 290系列自汽灭菌、动读取器60°C培养132°C真3h 空蒸汽灭菌 － Attest 1292 Attest1261 Geobacillus 55-60°C132°C压stearothermophilu培养24h 力蒸汽灭菌 s － Attest1291 Attest™ Geobacillus 290系列132°C压stearothermophilu自动读取力蒸汽灭菌 s 器60°C培养1h － 100 Bacillus atrophaeus Attest12 /12P Bacillus 35-39°C环氧乙烷灭培养48h 菌 － 50 Attest™ 环氧乙烷灭－ 100
Attest1294 atrophaeus 自动读取菌 器290G培养4h 50 四环 121°C下排气式压力蒸汽灭菌器、132~ 134°C预Geobacillus 56-60°C真空或脉动5.0×105 stearothermophilu培养24 ~ 25 真空压力蒸~5.0×106 s ATCC 7953 48h 汽灭菌器、134~136°C台式或卡式压力蒸汽灭菌器灭菌 使用方法：
1、将自含式生物指示剂置于灭菌最难达到的位置；
2、对负载灭菌，应根据有关规定，放置遍及负载的足够数量的自含式生物指示剂。注：建议不少于2个，通常每个循环使用10个。
3、使负载暴露于一个灭菌循环；
4、暴露后，在负载冷却或接触空气时尽快取出自含式生物指示剂； 5、压碎装有培养基的小玻璃瓶；
6、在适宜条件下培养，达规定时间后进行观察，读取结果；
7、若经过一个灭菌周期后，若有芽孢存活，则培养液会变浑浊或由紫色变为黄色；若芽孢被全部杀死，则培养液会保持最初的颜色。
8、记录试验结果；
9、阳性样品需经高压蒸汽灭菌处理。 贮存条件： 室温或2-8°C 保质期 12-24个月 品质保证
自含式生物指示剂的菌种来源于公认的菌种保藏机构，芽孢数量、D值和Z值均经过验证。
美国RAVEN灭菌指示剂
灭菌 湿热灭菌：湿热灭菌法指将物品置于灭菌柜过热水喷淋等手段使方内利用高压饱和蒸汽、
微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变形而杀式:
灭微生物的方法。灭菌能 力强，为热力灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法 干热灭菌：本法系指物品置于干热灭菌柜、
隧道灭菌器等设备中，利用干热空气达到杀灭微生物或消除热源物质的方法。 辐射灭菌：指将灭菌物品置于适宜放射源辐
射的γ射线或适宜的电子加速器发生的电子束中进行电离辐射而达到杀灭微生物的方法。最常用 Co60射线辐射 灭菌。 气体灭菌：指化学消毒剂形成的气体杀灭微
生物的方法，常用的化学消毒剂有环氧乙烷（EO）、气态过氧化氢、甲醛、臭氧等，适用于在气体中稳定的物品 灭菌。
消毒剂杀菌：适用于洁净室墙面、地面、设备表面等消毒
紫外射线杀菌：对于进入洁净区域的物体表面进行照射消毒。
过滤除菌：利用细菌不能通过之谜具孔滤材
的原理以除去气体或液体中的微生物的方法。
灭菌指示剂类型与区别 化学指示剂 生物指示剂 其原理基本都是某 简称BI，是一类特些化学物质都是用某种殊的活微生物制品，是化学物质作为指示剂，对特定灭菌工艺有一定当环境的整体条件达到耐受性并且能够定量测了变色的条件，化学物定灭菌效力的微生物制质就发生不可逆的颜色剂，可用于确认灭菌设变化，由此而判断灭菌备的性能、灭菌程序的器有没有达到灭菌的条验证、生产过程灭菌效件。 果的监控等。 两者的区别在于，前者验证灭菌的过程，后者则是验证灭菌的效果。即，化学指示剂通过变
色能判断整体灭菌的环境有没有达到特定的条件，但具体的灭菌效果如何，需要用芽孢条做验证。
RAVEN常用化学指示剂
湿热灭菌 干热灭菌 辐射灭菌 气体灭菌
常用的生物指示剂：
1. 湿热灭菌法，最常用的生物指示剂是嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953）。 2. 干热灭菌法，最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372）。
3. 辐射灭菌法，最常用的是短小芽胞杆菌孢子（ATCC27142）。
4. 气体灭菌法，最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372）。气态过氧化氢灭菌最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953）。
5. 过滤除菌法，最常用的生物指示剂为缺陷假单胞菌（ATCC19146）。用于滤膜孔径为0.22um的过滤器。粘质沙雷菌（ATCC14756）用于滤膜孔径为为0.45UM的滤器。（RAVEN无相关产品提供）
制备生物指示剂用微生物的要求
RAVEN生物指示剂类型 1、芽孢条
芽孢条是最基本的生物指示剂，被加载在过滤纸上，用玻璃纸单独包装，芽孢数从 1.0×10n到4.0×10n，有效期2年。
RAVEN的货号里，分别用“1” “3” “7”代表枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、短小芽孢杆菌，中间的数字表示芽孢数，后面的数字表示每包的数量。例如1-6500，表示枯草芽孢条，芽孢数106次方，500片/包。 2、自含式生物指示剂：
包括枯草芽孢杆菌跟嗜热脂肪芽孢杆菌，无短小芽孢。
3、自含式蒸汽灭菌安瓿瓶：用于大量液体的灭菌过程的理想指示剂，也可用于非液体的灭菌器中，内含芽孢和培养基，使用后直接培养。只有嗜热脂肪芽孢。
4、特殊载体的生物指示剂：如钢片、钢丝、芽孢悬液等。
如何选择合适的芽孢条
1、根据灭菌方法选择合适的芽孢种类； 2、根据灭菌所需要达到的存活概率，选择合适的芽孢数量，对于要求严格的医疗器械，通常使用106；
3、根据灭菌时间和温度，选择合适的D值，原则是使KILL TIME略低于所选的灭菌时间； 实际上，您只需告诉我们实际的灭菌条件，REVAN公司会根据该条件帮您选择合适的芽孢条。 培养中需要注意的地方
芽孢条的基本使用过程是将芽孢条连同产品一同灭菌，然后将芽孢条在胰蛋白胨肉汤（TSB）中培养。但需注意以下几点：
1、嗜热脂肪芽孢培养温度为55℃，枯草芽孢和短小芽孢为35℃，时间为7天，方能报告阴性； 2、培养基为TSB，但不同品牌的生长能力不同，所以推荐使用RAVEN的改良TSB，其修复受损细胞的能力比较好，经FDA认可，对嗜热芽孢的培养可以缩减至2天；
3、在灭菌锅中放置芽孢条的原则是，置于最难以灭菌的地方，如蒸汽灭菌锅中的冷点，或将芽孢条置于产品中；
4、每次灭菌均需使用芽孢做指示，事后的产品抽样检查是不能如芽孢实验一样确证灭菌效果； 生物指示剂的实验室管理
生物指示剂质量报告：内容包括微生物种类、含量、D值、有效期等，实验室在使用前要对BI进行质量复核，进行微生物数量的确认，进行登记并按说明存放。
文件要求：典型的微生物数量复核报告包含以下内容。BI含菌量确认、生产商、菌名、批号、标示含菌量、D值、效期、稀释过程、稀释倍数、计数结果、每个BI含菌量、是否合格等。可以将BI的产品质量报告或其复印件与上述文件一起存放。检验合格的BI要经过批准和发放后才可以使用。
