血清总蛋白TP测定
1检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果 的准确。
2实验原理
双缩腺比色终点法。在碱性条件下,蛋白与铜离子生成紫蓝 色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。
-0H> >紫红色复合物蛋白质+ Cu ----------------------------- 3标本采集病人准备:应禁食抽血3. 1
类型:血清3. 2
°C保存可稳8天;4〜6203. 3标本存放 ~25°C保存可稳定 1
年。周;定4-20°C保存至少可稳定 3.4标本运输室温 条件下运输细菌污染的不能做测定。标本拒收标准3. 5
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实验材料4
4.1试剂:上海复星长征医学科学有限公司TP试剂盒(沪
食药监械(准)字 2014 第 2400166 号 YZB/沪 1546-40-2014) 4. 1. 1试剂组成
氢氧化纳:200mmol/l 硫酸铜:12mmol/l
碘化钾 稳定剂
6mmol/l
淀石酸钾钠:mmol/l
4.1.2试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2〜25°C,若无 污
染,可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可 冰冻。开盖后应避免污染。
4.1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能
继续使用。
4.1.5注意事项:试剂中含有氢氧化钠,不可入口!如与皮
肤及粘膜接触,请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必 要的防护。
4.2校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的TP
校准品对自动分析仪进行校准。.
4.3质控品:使用正常值、病理值复合控制品。 5仪器
AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子 ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪 6操作步骤
6.1样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位
置。
6.2试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积
等确认无误后方可进行测定。
6.3项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗
氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝 TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6・4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗
氏 P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝 TBA-120生化分析仪操作规程。 质量控制7
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为 未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘 制质控图,判断是否在控。
8计算方法
以TP复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内, 仪器直接报告可靠的检测结果,以g/L报告。
9参考值范围[g/L]
60-83 g/L (注:各实验室应有自己的参考范围。)
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根 据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。
我室参考值范围:65-85 g/L
10临床意义
总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合
成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不 良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时 总蛋白浓度升高。 操作性能11
11. 1 线性范围:0—100g/L
11.2精密度:(1)重复性:变异系数(CV%) W4%; (2)批间 差:
相对极差(%) W5%。
11.3准确度:相对偏差(B)应不大于±10%
11.4灵敏度:10. Og/L样本的吸光度变化率(AA)应不小 于 0. 050
12超出范围结果处理
本法线性上限为100g/Lo如样品测定值超过上限时,应 将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘 以
2。
13病危报警值的处理
无警告/危急值。
14方法局限性
14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测 定
温度和测定时间的控制。
14.2高脂血清会引起测定结果假性升高,测定时应避免使
用。.
14.3试剂启用后,在2〜10°C避光的条件下可稳定30天。
若试剂混浊,或以水为空白在波长540nm处的吸光度大于
0.20时,则不能使用。 15补救措施
当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。
16参考文献
16. 1叶应妩,王毓山,申子瑜主编•全国临床检验操作规 程•
中华人民共和国卫生部医政司编•(第四版)
16. 2钱士匀主编•临床生物化学及生物化学检验实验指导. 人
民卫生出版社,2012年第5版
16. 3府伟灵,徐克前主编•临床生物化学检验•北京•人民卫
生出版社,2012年第5版
16.4试剂说明书