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实用医技杂志2008年6月第15卷第16期JPMT,June.2008,Vo1.15,No.16 ・2067・ 在肌酸(脱氢)酶和肌氨酸氧化酶的作用下生成过氧化氢,过 的.肌酐又称2.氨基.1.甲基咪唑啉.4.酮。肝素钠系自猪或 牛的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐,属黏多糖类物 质.体外有抗凝作用,肝素钠与肌酐不是同一类物质。肝素钠 对酶法肌酐测定产生正干扰的原因有待进一步探讨。 参考文献: 氧化氢在过氧化物酶(POD)的作用下生成醌系色素,由此可 测得肌酐的含量。酶法肌酐测定方法的出现从方法学上克服 了假肌酐对实验的影响,精密度高,干扰少,而且不污染仪器, 酶法测定肌酐的特异性高.特别适于自动分析f 1。因为用肝素 钠抗凝管采血能立即分离血浆进行测定,可以缩短检验时间, 有许多实验室采用肝素钠抗凝血浆作肌酐测定。以上实验结 果显示。肝素抗凝血浆组肌酐水平明显高于血清组,所以用酶 【1】 陈惠黎,王继贵.生物化学检验技术【M】.北京:人民卫生出版社, 1990:233. (收稿日期:2008一O3—12) 作者简介:王彦明(1964.),男,辽宁朝阳人,大连医科大学毕业, 法测定肌酐时不能使用肝素钠抗凝。 肌酐是肌酸代谢的最终产物.是在肌肉组织代谢产生 主管检验师。 应重视不公平竞争对乙肝抗HBc检测结果的影响 吴亦宏,杨本立,韩春燕 (高邮市界首中医院,江苏高邮225611) [关键词】乙肝标志物;不公平竞争;抗HBc;复检 [中图分类号]R512.642[文献标识码]B[文章编号]1671-5098(2008) 16-2067-02 ELISA竞争一步法检测乙肝抗HBc常有两种方法.方 后读取各孔的吸光度A值。三种方法检测的样本吸光度A值 法一是反应孔中预先包被抗HBc和HBcAg.待测样本中的 均按1~20、21~40、41~60、61~80孔计算均值。 抗体与酶标抗体竞争结合包被的HBcAg:方法二是预先包被 2结果 抗nBc。待测样本与酶标抗体竞争结合同步加入的HBcAg 2.1不同样本组别中的初、复检得到的吸光度A均值(见表 中和试剂,当样本中的抗nBc浓度增高时,酶标抗体竞争结 1)。由表1中可见.第一组中抗HBc初、复检的吸光度A值 合的HBcAg较少,显色降低。笔者在工作中体会到方法一由 无明显增加.第二及第三组中复检得到的吸光度A值明显高 于受检测原理的,当待测样本与酶标抗体不能同步加入 于初检的均值。本室在平时的工作中抗HBc检测的Cut-ofr 时会明显导致不公平竞争从而影响检测结果,应引起操作者 值(CO)通常在0.925~1.113之间,本次复检时的CO值为 的高度重视。报道如下。 1.015,无明显变化。 1材料与方法 表1 不同组别样本初、复检的吸光度A均值 1.1样本从本院2007年7月至l0月门诊、住院患者作乙肝 标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检测的样本 中挑取不同检测结果模式的样本共86例。其中第一组为 HBsAg(+)模式的样本30例(吸光度A均值为0.082),第二 组为一+一一+模式的样本20例(吸光度A均值为0.482), 2.2笔者改变对10例检测样本的加样顺序,以探讨加样时差 第三组为一一一一+模式的样本36例(吸光度A均值为 导致的不公平竞争对检测结果的影响,采用三种不同加样顺 0.522)。所有样本均再次复检抗HBc。另取第三组的10例样 序时测得的吸光度A均值:(1)法的吸光度A值随加样时间 本混匀作抗nBc测定。 延长而增高;(2)法逐步降低;(3)法无明显变化(见表2)。 1.2仪器与试剂 检测试剂为上海科华公司生产的ELISA一 表2 在不同加样顺序时的检测孔吸光度A均值 步法抗HBc检测试剂盒,该试剂预先包被的是抗nBc和 HBcAg。BioRad680型酶标比色计,手工洗板。 1.3方法将各组样本用抗HBc检测试剂盒复检。每孔样本 加入后随即加入酶标抗体,孵育洗板并显色后读取各组的吸 光度A均值,并与初检结果进行比较。另将10例混匀的样本 3讨论 按不同操作步骤作抗HBc检测,并读取吸光度A均值.以探 ELISA竞争一步法检测乙肝抗HBc时由于预先包被了 讨操作时差对结果的影响。具体步骤如下:在反应孔中先加入 HBcAg,当待检样本加样完毕后再加入酶标抗体导致的不公 混匀的样本,共80孔,再加入酶标抗体;先加入酶标抗体,然 平竞争是显而易见的.当样本量较大时尤其如此,其结果是酶 后加入样本共80孔。在每一个反应孔中加入样本后随即加入 标抗体竞争结合的HBcAg较少,吸光度A值下降,阳性率增 酶标抗体共80孔。其余步骤均按说明书严格操作,酶标比色 加n,21。作为乙型肝炎的流行病学指标。抗HBc在人群的血清 维普资讯 http://www.cqvip.com
・2068・ 实用医技杂志2008年6月第l5卷第l6期JPMT,June.2008,Vo1.15,No.16 中普遍存在,只是浓度不同而已。尽管临床通常检测的是经过 稀释后的样本.血清中的抗HBc仍然会率先与包被的 为主,其他模式应比较少见【31。由于实验室每天的样本数不 同,加样时差的影响也不一,要求对所有手工操作可能会出现 的抗HBc假阳性样本进行复检是不现实的。本文结果提示对 HBcAg结合使阳性率增加。不仅造成患者的紧张,也是造成 同一个患者前后检测结果不一致而实验室无法解释的原因。 因而对部分有疑问的结果进行复检是非常必要的。 第二及第三组的模式尤其是第三组模式尽可能全部复检是非 常必要的。有作者报道第三组中由于加样时差导致的假阳性 率高达73%嗍。此外加样时差对其余几项结果的影响也应引 起重视四。或者在使用竞争法一步法检测抗HBc时操作者应 本文表1中第一组HBsAg结果均为阳性,抗HBc初检 及复检后的吸光度A值几乎无变化,分析原因可能是HBsAg 阳性患者抗HBc的浓度较高,加样时差不足以影响吸光度A 在每一个样本加入后随即加入酶联试剂。 值.所以笔者认为无需复检。第二组的20例与第三组的36例 参考文献: 样本经复检后吸光度A值有明显增加。由于在抗HBc检测 [1】 丁华.操作时差对竞争法检测抗HBc结果的影响[J].医药论坛 时同一批号试剂的Cut.Ofr值(CO)通常稳定在一定的范围 杂志,2004,25(1):66—67. 内。吸光度A值的变化必然会导致部分样本前后检测结果不 『2】滕龙,陈钢,洪加林.酶免竞争一步法检测乙型肝炎病毒核心抗 一致,应该重视复检。 体的影响因素探讨【J]冲华检验医学杂志,2003,26(2):11l一112. 表2中的(11法为先加入待检样本后再加入酶标抗体,待 【3】瞿良,朱玉琨,王惠萱,等.循证检验医学在乙型肝炎病毒五项血 检样本中的抗HBc先于酶标抗体竞争结合包被的HBeAg, 清标志物体检中的应用[J]冲华检验医学杂志,2006,29(11): l046一lO47. 导致了吸光度A值的逐步增加。(2)法先加入的为酶标抗体, f4】徐玮,钱厚明.乙肝两对半检测部分模式的抗HBc阳性应该复 酶标抗体先行与包被的HBeAg结合,使得吸光度A值逐步 检【J】.山西医药杂志,2007. 下降。而在(3)法中样本与酶标抗体为同时加入,不存在不公 [5】钱厚明,赵江燕,周樱,等.加样时差对不同试剂检测乙肝病毒标 平竞争故吸光度A值无明显变化。以上结果充分说明了不公 志物的影响[J].临床输血与检验,2o07,9(1):44-45. 平竞争对检测结果的影响。 (收稿日期:2008—03-1 8) HBsAg阴性的“两对半”模式以全阴、HBsAb单项阳性 作者简介:吴亦宏(1972一),男,大学本科,主管检验技师。 影响尿沉渣分析仪检测红细胞的相关因素 赵燕霞,侯临萍,程育春 (临汾市人民医院,山西临汾041000) 【摘要】目的:探讨UF.1OOi尿沉渣分析仪检测RBC的相关影响因素。方法:809例标本均系我院2007年7月 至2008年2月的住院病人清晨留取的新鲜中段尿,由病区护士统一送至检验室。结果:UF一100i尿沉渣分析仪检测 RBC时受草酸钙结晶、真菌、精子C、成堆细菌颗粒、集聚成团的非晶形盐类结晶等物质的影响。结论:当仪器提示这 些物质存在时。RBC计数结果的可信度下降,一定要结合显微镜镜检、干化学分析来综合判断。 『关键词1尿沉渣分析仪;显微镜检查;RBC( ̄胞) 【中图分类号】R331.1+4l【文献标识码】B【文章编号】1671-5ogs(2oos)l 8-02 尿液分析在世界医学领域中作为疾病的诊断、预防和健 显微镜检查法,按照《全国临床检验操作规程》非染色尿沉渣 康普查方面的应用越来越便捷,分析的数据也更加精确【1]。自 镜检操作方法。 2002年以来,在《尿液沉渣检查标准化的建议》 指引下,统一 2结果(见表1) 检查方法,规范操作步骤,使结果更精确,更具可比性,更符合 表1 809尿沉渣RBC阳性与实际镜检结果对比 一.临床要求。然而,实际工作中,我们发现尿液分析仪与镜检之 间也存在一些误差因素,现就影响尿沉渣分析仪检测RBC的 相关因素.我们对809例RBC检测阳性的标本进行了镜检对 比分析。 1对象和方法 , 1.1研究对象809例标本均系我院2007年的7月至2008 年2月的住院病人留取的清晨中段尿,由病区护士统一送到 检验室,2h内检测完毕。 1.2仪器与试剂 日本system.uF一100i全自动尿沉渣分析仪 3讨论 及原装配套试剂;日本olympus cx3l型显微镜。 尿液标本必须新鲜,留尿后应在2 h内检测完毕,标本放 1.3方法尿沉渣分析仪,尿液自动混匀,严格按说明书操作; 置时间过长会因形态改变或细菌过多繁殖而影响RBC计数