维普资讯 http://www.cqvip.com ＣＨＩＮＥＳＥ ＪＯＵＲＮＡｌ ＯＦ ＡＮＡＴＯＭＹ Ｖｏ１．３０ Ｎｏ．１ ２００７ 解剖学杂志２００７年第３Ｏ卷第１期 去细胞异体神经的形态结构及移植后的组织相容性 朱国臣 （江苏省无锡市第二人民医院耳鼻咽喉科，无锡．２１４００２） 摘要 目的：为面神经缺损寻找一种理想的异体神经移植物。方法：取Ｗｉｓｔａｒ大鼠胫神经，经ＴｒｉｔｏｎＸ－１００和脱氧胆 酸钠溶液进行化学去细胞处理。将处理后的神经行组织学染色和免疫组织化学染色；并行异体移植修复面神经缺 损，观察其组织相容性。结果：去细胞神经为一中空的神经基质管，其中的细胞和髓鞘成分被有效清除，神经基底膜 被保留；异体移植后无明显炎症反应，无排斥和吸收反应，能引导宿主轴突和Ｓｃｈｗａｎｎ细胞增殖。结论：去细胞异体 神经移植物具有良好的仿生性和组织相容性，可能用于修复面神经缺损。 关键词神经移植；同种异体；面神经 Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｄｅｃｅｉｌｕｌａｒｉｚｅｄ ｎｅｒｖｅ ａｌｌｏｇｒａｆｔ ａｎｄ ｉｔｓ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｘｅｎｏｔｒａｎｓｐｌｎｔａｔｉａｏｎ Ｚｈｕ Ｇｕｏｃｈｅｎ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｙ，Ｗｕｘｉ Ｎｏ．２ Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｗｕｘｉ ２１４００２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ａｎ ｉｄｅａｌ ｎｅｒｖｅ ａｌｌｏｇｒａｆｔ ｆｏｒ ｒｅｐａｉｒｉｎｇ ｆａｃｉａｌ ｎｅｒｖｅ ｄｅｆｅｃｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｔｉｂｉａｌ ｎｅｒｖｅｓ ｆｒｏｍ Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ＴｒｉｔｏｎＸ－１００ ａｎｄ ｓｏｄｉｕｍ ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ．Ｔｈｅ ｄｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｚｅｄ ｎｅｒｖｅｓ ａｎｄ ｆｒｅｓｈ ｎｅｒｖｅｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ，Ｌｕｘｏｌ ｆａｓｔ ｂｌｕｅ ｓｔａｉｎｉｎｇ，ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｆｏｒ Ｌａｍｉｎｉｎ ａｎｄ￥１ＯＯ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｄｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｚｅｄ ｎｅｒｖｅ ｗａｓ ａｎ ｅｍｐｔｙ ｂａｓａｌ ｌａｍｉｎａ ｔｕｂｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｂａｓａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ， ｗｈｅｒｅ ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ，ａｘｏｎｓ ａｎｄ ｍｙｅｌｉｎ ｓｈｅａｔｈｓ ｗｅｒｅ ｒｅｍｏｖｅｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｚｅｄ ｎｅｒｖｅ ａｌ— ｌｏｇｒａｆｔ，ｔｈｅ ｏｕｔｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｔｈｅ ａｘｏｎ ａｎｄ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｃｈｗａｎｎ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｗｉｔｈｏｕｔ ｅｘｃｅｓｓｉｖｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｊｅｃｔｅｄ ａｎｄ ａｂｓｏｒｂｅｄ ｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｄｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｚｅｄ ｎｅｒｖｅ ａｌｌｏｇｒａｆｔ ｈａｓ ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ ｂｉｏｎｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄ ｍａｙ ｂｅ ａ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ ａｕｔｏｇｒａｆｔ ｔｏ ｒｅｐａｉｒ ｆａｃｉａｌ ｎｅｒｖｅ ｄｅｆｅｃｔｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｅｉｇｓ．ｎ Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｎｅｒｖｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；ａｌｌｏｇｒａｆｔ；ｆａｃｉａｌ ｎｅｒｖｅ 在同种异体之间进行周围神经移植，常因免疫 排斥反应而致手术失败，其排斥反应的标靶主要是 Ｓｃｈｗａｎｎ细胞和髓鞘Ｌ１ ］。最近发展起来的神经化 学去细胞方法，可有效地清除周围神经中的细胞及 髓鞘，为临床寻找理想的自体神经移植替代物开辟 了新的途径［６ ］。作者运用经该法制备的大鼠去细 胞胫神经，行同种异体移植修复面神经较长段缺损 后未被宿主排斥和吸收，其神经再生与自体神经移 植之间差异无统计学意义［８］。本实验对去细胞神经 ｉｃａｌｓ Ｌｔｄ ＰｏｏＬｅ公司，Ｌａｍｉｎｉｎ、￥１００单克隆抗体分 别购自武汉博士德生物工程有限公司和Ｎｅｏｍａｒｋｅｒｓ 公司，ＳＰ免疫组化染色试剂盒购自北京中山生物技 术有限公司。 １．２实验动物 选用健康Ｗｉｓｔａｒ成年大鼠，雌雄不拘，体质量 ２４０￣２６０ ｇ，由省实验动物中心提供。 １．３神经取材及化学去细胞处理 方法和步骤见参考文献［８］。 １．４新鲜神经和去细胞神经的组织学观察 １．４．１大体及手术显微镜下观察。 １．４．２制成石蜡切片，行Ｈ—Ｅ染色、ＬＦＢ髓鞘染 色、Ｌａｍｉｎｉｎ和￥１００免疫组织化学染色。 １．５去细胞神经异体移植的组织相容性观察 的形态结构和异体移植的组织相容性进行研究，旨 在为面神经缺损寻找一种理想的修复材料。 １材料和方法 １．１主要试剂 ＴｒｉｔｏｎＸ－ｌＯ０购自Ｓｉｇｍａ公司，脱氧胆酸钠购自 Ｆｌｕｋａ公司，Ｌｕｘｏｌ ｆａｓｔ ｂｌｕｅ（ＬＦＢ）购自ＢＤＨ Ｃｈｅｍ－ 收稿日期：２００６—０５—１６；修回日期：２００６—０７—２６ —— —— 大鼠１２只，采用１００ ｇ／Ｌ水合氯醛按０．３ ｇ／ｋｇ 腹腔注射，麻醉成功后无菌条件下显露面神经下颌 缘支，造成６ ｍｍ长的缺损并用去细胞神经桥接。分 别于术后１、２、４周取神经移植段及其近、远段，每 维普资讯 http://www.cqvip.com ］ ｍ 刚 Ⅲ 一～０ 滢 鳓鼬 —墨■啊■—■—圈 ｋ自 新鲜 ★ Ｊ 膪 纵 刀 ．ＩＩ 蛙纵 ．¨船乜， ２洲 Ｅ ２¨ｕ ★肘 ｋ 幢冲雉 研Ｈ Ｉ 胞 种 纵 ， 女 新鲜胫抻蛭纵 ＂． 女ｍ 自恤脏抻鞋纵 ¨ ｋ ＃ １咆 ｝砟 ｆ…ｕ ｃ…［古 日日眦腿抻经 【ｌ¨ｎ ｕｆＩｈ ／ｌ、】 】１ｌ ｛ｎｊｌ１ ｒｖ‘【】ｒ ｒ ＿￣，ＩＩ Ｅ ＩＪ ｌｍ【ｎ“ Ｉ．ＬＩ ＩＨ“ｌ ｔ、１－ｃ１ ｎ…ｌ『 ｈ Ｉｊ ｕｌ Ｉ ｔ ｌ】ｔＩ Ｅ ｒＴｌ‘…ｆ Ｔ ｆ ｓｈ Ｔｎ） ｒｆ 】ｒｖ １）『ｒｎ Ｔ¨＿Ｉ㈨Ｊ０ｈ｝ ｔ Ｉ…… 【 ａ…ｍ ｎ…Ｉ¨ｕＩ １１ 、１ … ｆ０ ¨ｕｄ ‘ｌＬｉｏｎ ｕＩ ＬＪ ｄ 【】ｊｕ Ｊ．Ｉｆ ｄ¨ｌ１，ｌ ｌ１１￣ｙｋ，Ｉ Ｉ ｒ ｌ￣．１ⅢＴ１１ｉ¨ ｌ１ １’ｉｌｃｈｌｉｔｌｌ［ Ｌｎ …ｉ ｌｒ ｆｌ１．Ｉ ｍｌｎｍ Ｉ 】¨ １ Ｌ１ ＬＩ ｌｒ１￣ｉ １Ｌ】 一一④ ｌ ，ｌ舢】ｌ－ 免世组ｇ｛化学 也．２１）ｆ） ｓ】ｉ“ 痤 ．．ｎ 班组 化毕船色 ２１¨ ㈨ 他 自．姗】 ｒ－ ＝－．， ．ｑ－曩化学舡包ｔ！ｃ】、【 ，－１一 一 ｆ件棒 悔堑饰冲释“［１１￣１１毓撕． ●－■■＿●｝ ，ｌ矬 ¨ ｃ）ｉ 疵蚰蚍化学‘ 乜 …】 ＃十 修复面 妊６ｍｍ缺｜６ｉ术 ｔ目社植 横 片羹蓝ｍ乜、Ｉ ｉｉ ｉ¨＿ ）ｒＩ ｆ １Ｉ１】【｝【【 ｒｖ¨ｌ『ｆ Ｈ ｓ＋Ｈ…Ｅ ｎ【… 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术侧面部切口愈合好。术后１周，移植段神经 内有轻微炎症反应，主要为中性粒细胞，而无 神经导管和细胞外基质促进神经再生的双重特点，具 有良好的仿生性和组织相容性，在不用免疫抑制剂和 种子细胞的情况下能够桥接同种异体面神经缺损，可 能是一种较为理想的神经修复材料，值得进一步研究。 参考文献 １ Ｆｏｘ ＩＫ，Ｓｃｈｗｅｔｙｅ ＫＥ，Ｋｅｕｎｅ ＪＤ，ｅｔ ａ１．Ｓｃｈｗａｎｎ－ｃｅｌｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ Ｓｃｈｗａｎｎ细胞表达。术后２周起移植段内炎性细胞 逐渐减少，Ｓｃｈｗａｎｎ细胞表达逐渐增多，有少量再生 神经轴突；术后４周起移植段内无炎性细胞， Ｓｃｈｗａｎｎ细胞表达继续增多，再生神经轴突继续增 多（图７、８）。 ｏｆ ｃｏｌｄ－ｐｒｅｓｅｒｖｅｄ ｎｅｒｖｅ ａｌｌｏｇｒａｆｔｓ．Ｍｉｃｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，２００５，２５（６）： ３讨论 ５０２—５０７． ２ Ｍｙｃｋａｔｙｎ ＴＭ，Ｍａｃｋｉｎｎｏｎ ＳＥ．Ａ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｅｎｄｅａｖｏｒｓ 目前认为异体神经移植物应达到以下要求 ］： ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｎｅｒｖｅ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｌ Ｒｅｓ，２００４， （１）清除所有细胞髓鞘及其崩解碎片，以降低抗原性； ２６（２）：１２４－１３８． （２）保留由神经外膜、束膜和内膜组成的胶原性管状结 ３ Ｓｅｎ ＳＫ，Ｌｏｗｅ ＪＢ，Ｂｒｅｎｎｅｒ ＭＩ，ｅｔ ａ１．Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍ 构，成为良好的轴突再生通道；（３）保留Ｓｃｈｗａｎｎ细胞 ｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｄｏｓｅ ｏｆ ｎｅｒｖｅ ａｌｌｏｇｒａｆｔｓ．Ｐｌａｓｔ Ｒｅｃｏｎｓｔｒ Ｓｕｒｇ， 的基底膜，以诱导和增强宿主Ｓｃｈｗａｎｎ细胞迁移及轴 ２００５，１１５（３）：８２３—８３０． 突再生；（４）使之标准化、程序化。 ４丁文龙，温蔚，谢志新．ｂＦＧＦ对同种异体神经移植后周围神经 再生的影响．解剖学杂志，２００３，２５（２）：１４１—１４５． 最近研究报道对鼠坐骨神经进行化学处理，证 ５孙明学，唐金树，王鑫，等．去细胞处理对化学去细胞异体神经 明细胞、髓鞘等结构及其崩解碎片已完全消除，而基 免疫原性的影响．中华外科杂志，２００６，４４（４）：２７５—２７８． 底膜得以完整保留，异体移植后发现化学去细胞神 ６ ｌｍ０ｎｔＣＥ．ＨｅｎｔｚＶＲ．Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆａｘｏＦｌ ｇｒｏｗｔｈ ｂｙ ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ 经能够促进和引导宿主Ｓｃｈｗａｎｎ细胞向移植段内迁 ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｎｅｒｖｅ ｇｒａｆｔｓ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，１９９７，６３（９）：１２１￣１２１５． 移［６ ］。本实验在Ｓｏｎｄｅｌｌ法的基础上，建成大鼠胫 ７ Ｓｏｎｄｅｌｌ Ｍ，Ｌｕｎｄｂｏｒｇ Ｇ，Ｋａｎｊｅ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔ ｓｃｉａｔ— ｉｃ ｎｅｒｖｅ ｉｎｔｏ ａｌｌｏｇｒａｆｔｓ ｍａｄｅ ａｃｅｌｌｕｌａｒ ｔｈｒｏｕｇｈ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｅｘｔｒａｃ— 神经的化学去细胞方法。经该法处理的神经通过光 ｔｉｏｎ．Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ，１９９８，７９５（卜２）：４４—５４． 镜的组织学和免疫组织化学染色等研究，证明达到 ８朱国臣，肖大江，娄卫华．去细胞异体神经桥接面神经缺损的实 了上述要求。本实验结果显示移植物未被排斥和吸 验研究．中华创伤杂志，２００５，２１（１１）：８４９—８５１． 收，局部炎性反应随着实验观察周期的延长而逐渐 ９刘承吉，孙景致，佟晓杰，等．组织工程化天然神经支架的制备． 减轻直至消失，能够引导宿主Ｓｃｈｗａｎｎ细胞和轴突 解剖科学进展，２００３，９（３）：１９７—２００． （编辑：刘 芳） 沿其内管壁向移植段迁移和增殖。 解剖学杂志２００７年第３Ｏ卷第１期 肋肩胛肌一例 安月勇 尉洪亮 曲永松 （１莱阳卫生学校解剖学教研室，莱阳 ２６５２００；２烟台市毓璜顶医院，烟台２６４０００） 在解剖一具男性尸体时发现颈部左侧一异常肌，按起止 腹侧。此肌全长１Ｏ．７ ｃｍ，肌腹长６．３ ｃｍ，最宽处１．１ ｃｍ，厚 点命名为“肋肩胛肌”。据其位置判断，此肌类似于段坤昌等 ０．２ ｃｍ。 报道的“胸肋肩胛肌”，出现率２．９４ （中国临床解剖学杂志， 此异常肌可以使肋锁间隙变窄。在标本上证明，当肩关 １９８８，６：１９９）；冯正明报道的“肩胛胸锁肌”（解剖学杂志， 节前屈超过９Ｏ。、肩胛骨上缘后倾时此肌可压迫臂丛和锁骨下 １９８５，８：２１）。此肌以细腱起于第１肋骨与肋软骨移行处的上 动、静脉。因此，临床上若出现臂丛和锁骨下动、静脉受压的 面，位于肋锁间隙内，以弧形斜向后外，越过锁骨下动、静脉 相应临床症状时，应注意是否有“肋骨肩胛肌”的存在。 及臂丛神经的前方，止于肩胛骨的上缘、肩胛舌骨肌起点的 （编辑：黄会龙） 作者一Ｅ－ｍａｉｌ：ａｎｙｕｙｏ（￣ｍａｉｌ．ｃｈｉｎａ．ｃｏｍ ６一
