Ｆｅｂ．２０１７．３７（１） 实验动物与比较医学Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ・ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４—５８１７．２０１７．０１．００１ 论 著・ ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ对ＳＴＺ诱导的１型 糖尿病小鼠心脏功能的影响 陈翠 ，孟哲颖１，郑元义１，胡兵１－一，申锷１，２，３ （１．上海交通大学附属第六人民医院，上海２００２３３； ２．上海超声医学研究所，上海２００２３３； ３．上海交通大学医学院附属同仁医院，上海２００３３６） ［摘要】 目的 探讨成纤维细胞生长因子２１（ＦＧＦ２１）ｓｉＲＮＡ对链脲佐菌素（ＳＴＺ）诱导的ｌ型糖尿病 （Ｔ１ＤＭ）小鼠心脏功能的影响机制。方法 ｌ６只８周龄雄性Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠随机分为正常对照组 ＝６），ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ对照组（ ＝１０），１６只Ｔ１ＤＭ模型小鼠分为Ｔ１ＤＭ组 ＝６），Ｔ１ＤＭ＋ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ 组（ ＝１Ｏ）。Ｔ１ＤＭ模型由单次腹腔注射ＳＴＺ（１５０ ｍｇ／ｋｇ）建立。８周后行ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ给药。实验 到达终点时采用小动物高分辨超声仪测量小鼠心脏功能；光学显微镜下ＨＥ染色观察心肌细胞形态， Ｍａｓｓｏｎ染色观察纤维化程度，利用实时ＰＣＲ技术检测心肌组织Ｏｃ一肌球蛋白重链（Ｏｃ．ＭＨＣ），Ｂ一肌 球蛋白重链（Ｂ—ＭＨＣ），心房钠尿肽（Ａ＾ ）、Ｉ型胶原（Ｃｏｌ Ｉ）和ＩＩＩ型胶原（Ｃｏｌ ＩＩＩ）及ＦＧＦ ２１ ｍＲＮＡ 的表达含量。结果与正常对照组小鼠相比，Ｔ１ＤＭ小鼠的心脏功能减低，心肌细胞肥大，胶原 ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ能降低１型糖尿病小鼠的 纤维增生，伴随小鼠心肌组织Ａ州。、０ｃ．ＭＨＣ、［５－ＭＨＣ、Ｃｏｌ Ｉ、ｃＤｆ ＩＩＩ ｍＲＮＡ表达增加，Ｔ１ＤＭ 小鼠经ＦＧＦ ２１ｓｉＲＮＡ处理后上述表现进一步加重。结论心脏功能，其机制可能与心肌肥大和心肌纤维化有关。 ［关键词］成纤维细胞生长因子２１（ＦＧＦ ２１）ｓｉＲＮＡ；１型糖尿病（Ｔ１ＤＭ）；糖尿病心肌病；心肌肥大； 心肌纤维化 ［中图分类号］Ｑ９５—３３［文献标识码］Ａ 【文章编号］１６７４－５８１７（２０１７）０１—０００１—０５ １９７２年Ｒｕｂｌｅｒ等【 】研究了４例伴有充血性心力 衰竭的糖尿病患者，其冠状动脉正常，没有其他引 起充血性心力衰竭的病因，他们提出该疾病是由糖尿 病心肌病导致。Ｂｅｌｌ等【ｚ］将糖尿病心肌病定义为与 冠状动脉疾病不相关的疾病，它以舒张功能障碍为 特征，少有明显的临床表现，除非并发高血压（临 床表现明显时）和／或心肌缺血（临床表现严重时）。 成纤维细胞生长因子２１（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ 产生和分泌【 。ＦＧＦ２１也在其他组织中表达，例如 心肌［４］。ＦＧＦ２１作为内源性的物质代谢调节因子，其 与肥胖、糖尿病及代谢综合征等代谢性疾病的关系 研究已成为热点，人血清ＦＧＦ２１在上述疾病中表达 的升高提示ＦＧＦ２１参与代谢性疾病的发生发展【５ 。１ 然而，ＦＧＦ２１对心脏的作用还有待深入研究。现有 研究『７１表明ＦＧＦ２１通过促进大量抗氧化基因表达阻止 心脏肥大，并且以自分泌形式抑制活性氧形成。１型 糖尿病（ＴＩＤＭ）大鼠的心脏ＦＧＦ２１ ｍＲＮＡ表达与糖尿 病进展呈正相关 。本实验拟用ＳＴＺ诱导的小鼠 ２１，ＦＧＦ２１）是含有２０９／２１０个（人／啮齿类动物）氨基 酸残基组成的多肽，主要由肝脏、脂肪组织及胸腺 【收稿日期］２０１６—０９—０６ Ｔ１ＤＭ模型，应用ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ降低小鼠ＦＧＦ２１的表达， 【基金项目】国家自然科学基金面上项目（ＮＯ．８１２７０２０８） ［作者简介】陈翠（１９８９．），女，临床医学硕士研究生。 Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｊｔｕｃｈｅｎｃｕｉ１９８９＠１６３．ｃｏｍ 【通讯作者】申 锷（１９６８．），女，主任医师，从事糖尿病心肌病 研究。Ｅ．ｍａｉｌ：ｓｈｅｎｅ１２６＠１２６．ｃｏｍ 观察小鼠心脏功能变化、心肌组织Ｏｃ一肌球蛋白重链 （０ｃ．ｍｙｏｓｉｎ ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ，０【．ＭＨＣ）、Ｄ一肌球蛋白重链 （［￣－ｍｙｏｓｉｎ ｈｅａｗ ｃｈａｉｎ，￣ＭＨＣ）、心房钠尿肽（ＡＮＰ）、 Ｉ型胶原（Ｃｏｌ Ｉ）和Ⅲ型胶原（ＣｏｌⅢ）表达，从功能及结 构方面探讨ＦＧＦ２ １对糖尿病心肌病的影响机制。 ２ 实验动物与比较医学Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １材料与方法 １．１糖尿病动物模型建立及分组 １．４光学显微镜下观察心肌细胞形态及胶原纤维 小鼠左心室心肌组织用体积分数１０％中性甲醛 固定，脱水、清洗、石蜡包埋后制成切片，ＨＥ染 ＳＰＦ级雄性Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠４０只，５－－６周龄，体 质量１８￣２０ ｇ，购于上海斯莱克实验动物有限公司 ［ＳＣＸＫ（沪）２００７—０００５】，于上海交通大学附属第六 人民医院动物实验中一ｔ￣，［ＳＹＸＫ（沪）２０１ １－０１２８］操作实 验。小鼠达８周龄后，随机选取２０只通过一次性 色及Ｍａｓｓｏｎ染色后在光学显微镜下观测并摄片。 １．５实时ＰＣＲ检测 使用Ｔｒｉｚｏｌ试剂抽提总ＲＮＡ并检测浓度和纯度， 取２ 总ＲＮＡ按照Ｍ—ＭＬＶ逆转录酶行反转录（ＲＴ）， 合成ｃＤＮＡ，加入特异引物（引物序列见表１）及ＰＣＲ 腹腔注射链脲佐菌素（ＳＴＺ）（１５０ ｍｇ／ｋｇ）建立Ｔ１ＤＭ 所需试剂，行ＰＣＲ循环。检测目的基因 一ＭＨＣ、 ￣３－ＭＨＣ、Ｃｏｌ Ｉ和Ｃｏｌ ＩＩＩ、ＡⅣＰ及ＦＧＦ ２１ ｍＲＮＡ。 甘油醛一３一磷酸脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）作为内参。总反应 体积为２Ｏ ＵＬ，扩增条件为９４℃预变性５ ｍｉｎ，９４℃ ６０ Ｓ，６２ ｏＣ４０ Ｓ，７２℃６０ Ｓ，延伸１０ ｍｉｎ，内参 小鼠模型，４８ ｈ后经鼠尾静脉采血并检测，血糖大于 １６．７ ｍｍｏｌ／Ｌ为成模。本实验中成模率８０％，成模后 随机选取同等数量正常组小鼠１６只，共３２只小鼠分为 ４组：正常对照组（ ＝６），ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ对照组（ ＝１０）， Ｔ１ＤＭ（ｎ－－－６），Ｔ１ＤＭ＋ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ组（ｎ＝１０）。成模８ 扩增２７个循环，目的基因扩增３２个循环。以目的 基因Ｂ—ＭＨＣ、０ｃ．ＭＨＣ、ＡＮＰ、Ｃｏｌ Ｉ、Ｃｏｌ ＩＩＩ及 周后行ＦＧＦ２ｌｓｉＲＮＡ尾静脉注射，给药剂量为５ Ｂｇ／ｇ， 实验于给药７２ ｈ后结束。 １．２主要试剂及仪器 ＳＴＺ（美国Ｓｉｇｍａ公司），Ｏｎｅｔｏｕｃｈ ＩＩ血糖仪（美 国强生公司）；小动物用高分辨超声仪（Ｖｅｖｏ２１００，加 拿大ＶｉｓｕａｌＳｏｎｉｃｓ公司）；ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ（Ｇｅｎｅｐｈａｒｍａ， ＦＧＦ２ １与ＧＡＰＤＨ比率做定量分析。 １．６统计学处理 用ＳＰＳＳ２ １．０统计软件包完成数据统计分析， 计量资料以均数±标准差表示，组问比较用单因素 方差分析（Ｏｎｅ．ｗａｙ ＡＮＯＶＡ），两两比较用 检验， Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 上海），ＤＥＰＣ水，转染试剂，葡萄糖，Ｔｒｉｚｏｌ试剂 （美国Ｓｉｇｍａ公司）。 １．３超声心动图技术测量心脏功能 ２结果 ２．１糖尿病小鼠体质量及血糖变化 ＳＴＺ注射后４８ ｈ小鼠较正常组小鼠体质量降 低，血糖升高（Ｐ＜Ｏ．０５），表明造模成功。各组小 鼠体质量及血糖变化（表２）。 ２．２糖尿病小鼠心脏功能变化 相比于正常对照组，Ｔ１ＤＭ组小鼠ＥＦ，ＦＳ明显 减低 《０．０５）；Ｔ１ＤＭ＋ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ组比Ｔ１ＤＭ组ＥＦ和 于实验终点使用小动物高分辨超声仪检测小鼠 心脏功能：腹腔注射质量分数１．５％戊巴比妥钠进行 麻醉（０．１ ｍＬ／２０ ｇ），然后将小鼠固定在３７℃的恒温 垫上，小鼠四肢末端用４个电极连接。获取胸骨 旁长轴切面Ｍ型超声心动图，测定左心室舒张末 期内径（ＬＶＩＤｄ），左室收缩末期内径（ＬＶＩＤｓ），取 ３个持续心动周期的平均值作为原始数据，软件自 动测算左室短轴缩短率（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ ｓｈｏｒｔｅｎｉｎｇ，ＦＳ）， 左室射血分数（ｅｊｅｃｔｉｏｎ ｆｒａｃｔｉｏｎ，ＥＦ）。 ＦＳ进一步减ｔｋ￣（Ｐ＜Ｏ．０５）；但ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ对照组与正常 对照组差异不具有统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）（表３、图１）。 表１［￣－ＭＨＣ，０【－ＭＨＣ，Ｃｏｌ Ｉ，Ｃｏｌ ＩＩＩ，ＡＮＰ，ＦＧＦ２１，ＧＡＰＤＨ的ＰＣＲ扩增引物 Ｔａｂｌｅ １ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ［￣－ＭＨＣ，０【－ＭＨＣ，Ｃｏｌ Ｉ，Ｃｏｌ ＩＩＩ，ＡＮＰ，ＦＧＦ２１，ＧＡＰＤＨ Ｆｅｂ．２０ １ ７，３７（１ 实验动物 比较ｌ父学Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 表２各组小鼠体质量及血糖 Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ ａｎｄ ｂｌｏｏｄ ｇｌｕｃｏｓｅ ｉｎ ｍｉｃｅ ３ 沣： ｊ 常埘照纠儿Ｅ较 Ｐ＜０．０５ ２．３心肌细胞形态改变及胶原纤维增生 与正常埘ｊ！｛｛组小鼠心肌细胞（ ２Ａ）比较， ＴｌＤＭ绀小鼠心肌排列紊 Ｌ，心肌细胞肥大，细胞 核增大（图２Ｃ） ＦＧＦ２ｌ ｓｉＲＮＡ处理ＴＩＤＭ小鼠后，心 表３小鼠心脏功能变化 Ｔａｂｌｅ ３ Ｃａｒｄｉａｃ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｅ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ ％ 肌细胞肥大 俊及细胞核增大程度ｌ史 蒋（ ２Ｄ）， 单纯ＦＧＦ ２ｌ ｓｉＲＮＡ处 细则末见 显改变（图２Ｂ）。 Ｍａｓｓｏｎ染色Ｉ＿｝，Ｊ ＦＧＦ２１ ｓｉＲＮＡ处 后ｆＩ勺ＴｌＤＭ小 鼠（图２Ｈ）较术处 小鼠（图２Ｇ）胶 纤维 增 汁： Ｐ＜０ ０５ ＪＦ ０对照组比较， Ｐ＜０．０５： ｊ Ｔ１ ＤＭ组比较 ＪＪｌＪ，正常埘照 （ ２Ｅ）与ＦＧＦ２ｌ ｓｉＲＮＡ组（图２Ｆ） 汴：ａ：ＩＦ常对照组：ｂ：ＴＩＤＭ；ｃ：ＦＧＦ２Ｉ ｓｉＲＮＡ对照 ：ｄ：Ｔ１ＤＭ＋ＦＧＦ２１ ｓｉＲＮＡ纠【 图１小鼠心脏超声表现 Ｆｉｇｕｒｅ １ Ｅｃｈ０ｃａｒｄｉ０ｇｒａｐｈｙ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ ｍｉｃｅ Ａ：ＪＩｉ ０对照纠ｌ（ＨＥ×４０）：Ｂ：ＦＧＦ２１ ｓｉＲＮＡ对照组（ＨＥ×４０）：Ｃ：Ｔ１ＤＭ组【（ＨＥ×４０）：Ｄ：Ｔ１ＤＭ＋ＦＧＦ２ Ｉ ｓｉＲＮＡ红Ｉ（ＨＥ×４０）： Ｅ： ｆ 对照组（Ｍａｓｓ０ｎ×４０）：Ｆ：ＦＧＦ２１ ｓｉＲＮＡ对照坌ｌｌ（Ｍａｓｓｏｎ×４０）；Ｇ：Ｔ１ＤＭ￣ｌｌ（Ｍａｓｓｏｎ×４０）：Ｈ：ＴＩＤＭ＋ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ （Ｍａｓｓｏｎ×４０） 图２小鼠心肌细胞形态及胶原纤维增生 Ｆｉｇｕｒｅ ２ Ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｒｏ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ４ 实验动物与比较医学Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 未见明显差异。 ２．４ ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ沉默效果 与正常对照组比较，ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ处理组心肌组 织内ＦＧＦ ２１ ｍＲＮＡ表达水平降低（Ｐ＜０．０５），表明 ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ有效沉默ＦＧＦ ２１ ｍＲＮＡ表达（图３）。 ２．５心肌组织Ｂ，０ｃ．ＭＩ－ＩＣ、Ｃｏｌ Ｉ、Ｃｏｌ ＩＩＩ、ＡＮＰ变化 与正常对照组比较，Ｔ１ＤＭ组小鼠心肌组织 内１３／ａＭＨＣ比值及ＡＮＰ，Ｃｏｌ Ｉ，Ｃｏｌ ＨＩ表达水平均升 高（Ｐ＜Ｏ．０５）；Ｔ１ＤＭ＋ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ组１３／ａＭＨＣ比值 及ＡＮＰ，Ｃｏｌ Ｉ，Ｃｏｌ ＩＩＩ表达水平较Ｔ１ＤＭ组升高 （Ｐ＜０．Ｏ５）：但ＦＧＦ２１ ｓｉＲＮＡ对照组与正常对照组差异 不具有统计学意义（Ｐ＞０．Ｏ５）（表４）。 正常对照组 ＦＧＦ２１ｓＩＲＮＡ组 与正常对照组比较， Ｐ＜０．０５ 图３ ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ处理组ＦＧＦ２１ｍＲＮＡ表达量 Ｆｉｇｕｒｅ３ ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＦＧＦ２１ｍＲＮＡｉｎｃａｒｄ￣ｃｔｉｓｓｕｅｏｆｍｉｃｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ 表４各组小鼠，ｂｌＥ．ｉ￣ｑ￣／ｆａ－ＭＨＣ、ＣｏｌＩ、ＣｏｌＩＨ、ＡＮＰ变化 Ｔａｂｌｅ ４ Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ￣／ａ－ＭＨＣ，Ｃｏｌ Ｉ，Ｃｏｌ ＩＩＩ，ＡＮＰ ｉｎ ｃａｒｄｉａｃ ｉｔｓｓｕｅ ｏｆ ｍｉｃｅ ｛ｌ｝ 僻靛目聿ｖＮ 基 ：ｉ！ ● 毫 ｜一Ｐ ２ Ｏ 注：与正常对照组比较， Ｐ＜０．０５；与ＤＭ比较， ＜０．０５ ３讨论 血清ＦＧＦ２１与心血管疾病关系密切，动脉粥样 ｐｍ—ＭＨＣ比值进一步升高，差别具有统计学意 义，符合光学显微镜下观察到的心肌细胞肥大表 现。实验结果表明ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ可促进心肌组织中 硬化、冠心病、心肌缺血，心脏肥大，糖尿病心肌 病的患者血清中ＦＧＦ２１含量增加『３］。外源性ＦＧＦ２１ ＡＮＰ表达及升高ｐ／ａ．ＭＨＣ比值。以往的研究［１０１报 道高血糖引发糖尿病心肌病并且启动一系列刺激因 素进而引起心肌纤维化及胶原沉积，心肌纤维化主 要表现为心肌胶原含量增加，胶原类型及胶原比例发 干预能显著预防ＤＭ早期诱导的心肌细胞凋亡ｆ８１，内 源性ＦＧＦ２１在糖尿病状态下也能发挥抗心肌细胞凋 亡作用 。本实验应用ＳＴＺ构建ＤＭ病小鼠模型， 通过ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ降低小鼠心肌中ＦＧＦ２１ ｍＲＮＡ表 达，研究ＦＧＦ２ｌ与糖尿病心肌病的关系。超声心 动图检查显示Ｔ１ＤＭ组小鼠心脏功能低于正常组， 经过ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ处理后心脏功能进一步降低，表明 ＦＧＦ２１ ｓｉＲＮＡ可降低心脏射血分数及左室短轴缩短 率，降低Ｔ１ＤＭ小鼠的心脏功能。 Ｂ／０ｃ．ＭＨＣ比值及ＡＮＰ是反应心肌肥大的代表 性指标。与正常对照组小鼠相比，Ｔ１ＤＭ组小鼠心 生改变，心肌组织中主要含有Ｃｏｌ Ｉ和Ｃｏｌ ＩＩＩ。本 实验中Ｔ１ＤＭ组小鼠较正常组小鼠心肌组织中Ｃｏｌ Ｉ、 Ｃｏｌ Ｉｌｌ表达显著增加，ＦＧＦ２ｌｓｉＲＮＡ处理后表达程 度进一步增加，这与光学显微镜下观察到胶原纤维 增生进展表现一致，表明ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ可引起心肌 组织胶原纤维增生。 本实验结果显示：ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ可引起心肌肥大 和心肌纤维化，使心脏功能减低；该作用可能是通 过影响心肌肥大及心肌纤维化关键基因转录水平的 表达实现的。 肌组织中ＡＮＰ表达明显增加，ｐ／ａ．ＭＨＣ比值明显升 高，ＦＧＦ２１ ｓｉＲＮＡ处理后，ＡＮＰ表达进一步增加， Ｆｅｂ．２０１７．３７（１） 实验动物与比较医学Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５ 参考文献： ［１】Ｒｕｂｌｅｒ Ｓ，Ｄｌｕｇａｓｈ Ｊ，Ｙｕｃｅｏｇｌｕ ＹＺ，ｅｔ ａ１．Ｎｅｗ ｔｙｐｅ ｏｆ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｓｃｌｅｒｏ— ［６］Ｍｒａｚ Ｍ，Ｂａｒｔｌｏｖａ Ｍ，Ｌａｃｉｎｏｖａ Ｚ，ｅｔ １．Ｓｅｒｕｍ ａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｆｉｂｒｏ． ｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－２１ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｔｙｐｅ ２ ｄｉａｂｅｔｅｓ ａｎｄ ｏｂｅｓｉｔｙ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２００９，７１（３）：３６９—３７５． ［７１ Ｐｌａｎａｖｉｌａ Ａ，Ｒｅｄｏｎｄｏ ＡＩ，Ｒｉｂａｓ Ｆ，ｅｔ ａ１．Ｆｉｂｒ０ｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ２１ｐｒｏｔｅｃｔｓｔｈｅｈｅａｒｔｆｒｏｍｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ【Ｊ】．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ ｓｉｓ【Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｃａｒｄｉｏｌ，１９７２，３０（６）：５９５—６０２． ［２】Ｂｅｌｌ ＤＳ．Ｄｉａｂｅｔｉｃ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ［Ｊ］．Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｃａｒｅ，２００３， ２６（１０）：２９４９—２９５ １． 【３】Ｃｈｅｎｇ Ｐ，Ｚｈａｎｇ Ｆ，Ｙｕ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｎｄ ａｐｈａｒｍａｃｏ— ｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ＦＧＦ２１ ｉｎ ｃａｒｉｏｖａｓｄｃｕｌｒ ａｉｓｄｅａｓｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｄｉａｂｅ— ｔｅｓ Ｒｅｓ，２０１６，２０１６：１５４０２６７． Ｒｅｓ，２０１５，１０６（１）：１９—３１． ［８】张芳芳，林秀飞，陈聪聪，等．Ａｋｔ在ＦＧＦ２１预防糖尿病心 肌病中的作用研究［Ｊ］．温州医科大学学报，２０１６，４６（７）： ４９０—４９６，５０２． ［４】ＺｈａｎｇＣ，ＨｕａｎｇＺ，Ｇｕ Ｊ，ｅｔａ１．Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ２１ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ｔｈｅ ｈｅａｒｔ ｆｒｏｍ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ａ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｖｉａ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌ・－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ １１２一ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｉｇ－ ［９］Ｐｌａｎａｖｉｌａ Ａ，Ｒｅｄｏｎｄｏ Ｉ，Ｈｏｎｄａｒｅｓ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ２１ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｃａｒｄｉａｃ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ ｉｎ ｍｉｃｅ［Ｊ】． Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎ，２０１３，４：２０１９． ｎａｉｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ】．Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，２０１５，５８（８）：１９３７—１９４８． ［１０］ＡｎｅｊａＡ，ＴａｎｇＷＨ，ＢａｎｓｉｌｌＳ，ａｅｔａ１．Ｄｉａｂｅｔｉｃｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ： ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ，ａｎｄ ｔｈｅｒａ— 【５］ＷｏｏＹＣ，ＸｕＡ，ＷａｎｇＹ，ｅｔａ１．Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ２１ ａｓ ｎ ａｅｍｅｒｇｉｎｇ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ：ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ ｐｅｕｔｉｃ ｏｐｔｉｏｎｓ［Ｊ１．Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ，２００８，１２１（９）：７４８—７５７． Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２０１３，７８（４）：４８９—４９６． Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｒｄｉａｃ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ ｉｎ Ｔｙｐｅ １ Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｍｉｃｅ ＣＨＥＮ Ｃｕｉ ，ＭＥＮＧ Ｚｈｅ—ｙｉｎｇ ，ＺＨＥＮＧ Ｙｕａｎ—ｙｉ ，Ｈｕ Ｂｉｎｇ ，一，ＳＨＥＮ Ｅ ’ ｒ＿ｆ．Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｓｉｔｙ Ａｆｉｌｉｆａｔｅｄ Ｎｏ．６ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００２３３，Ｃｈｉｎａ ２．Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００２３３，Ｃｈｉｎａ ３．Ｔｏｎｇ Ｒｅｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｈｏｏｌ ｆＭｅｄｉｏｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００３３６，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ２ １（ＦＧＦ２ １）ｓｉＲＮＡ ｏｎ ｃａｒｄｉａｃ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｙｐｅ １ ｉａｂｅｔｄｉｃ（Ｔ１ＤＭ）ｍｉｃｅ ａｎｄ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ａｃｔｉｏｎｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｓｉｘｔｅｅｎ Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ，ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ＦＧＦ２ １ ｓｉＲＮＡ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｓｉｘｔｅｅｎ Ｔ１ＤＭ ｍｏｄｅｌ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ Ｔ１ＤＭ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ Ｔ１ＤＭ＋ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ ｇｒｏｕｐ，ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｗａｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＳＴＺ．Ｃａｒｄｉａｃ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｅｃｈｏｃａｒｄｉｏｇｒａｐｈｙ，ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ，ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ Ｍａｓｓｏｎ ｓｔａｉｎｉｎｇ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｏ【．ｍｙｏｃｉｎ ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ（０【一ＭＨＣ），Ｄ—ｍｙｏｃｉｎ ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ（ｐ－ＭＨＣ），ａｔｒｉａｌ ｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ（ＡＮＰ），ｔｙｐｅ Ｉ ｃｏｌｌａｇｅｎ（Ｃｏｌ Ｉ）ａｎｄ ｔｙｐｅ ＩＩＩ ｃｏｌｌａｇｅｎ（Ｃｏｌ ＩＩＩ）ｏｆ ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ０ｃ—ＭＨＣ，－ＭＨＣ，ＡＮＰ，Ｃｏｌ Ｉ ａｎｄ Ｃｏｌ ＩＩＩ ｉｎ ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ ｏｆ Ｔ１ＤＭ ｍｉｃｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｈ ｔＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ｏｎｅｓ．Ｃａｒｄｉａｃ ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ ａｎｄ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒｅａｔｅｄ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｗｏｒｓｅ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ｏｎｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ ｍａｙ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ ｔｏ ｃａｒｄｉａｃ ｍａｌｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｔ１ＤＭ ｍｉｃｅ，ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ，ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】ＦＧＦ２１ｓｉＲＮＡ；Ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｉｃ（Ｔ１ＤＭ）；Ｄｉａｂｅｔｉｃ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ；Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ； Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ
