・４２・ 安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０１２ Ｊａｎ；１６（１） 维胺酯胶囊中维胺酯的含量及有关物质的ＨＰＬＣ法研究 郎俊 ２４４０００） （安徽省铜陵市妇幼保健院，安徽铜陵摘要：目的＝测定维胺酯胶囊中维胺酯的含量及有关物质。方法采用日本分光ＪＡＳＣＯ．１５００系列高效液相色谱仪，Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ。 柱（２５０ ｍｍ×４．６ ｌｎｍ，５ Ｉｘｍ），以甲醇一醋酸（１００：０．２）为流动相，流速为０．７５ ｍｌ・ｒａｉｎ～，紫外检测波长３７０ ｎｍ，灵敏度ＡｕＦｓ ０．０２，柱温为２５￣Ｃ。结果维胺酯在２．０—１２．０ ｍｇ・Ｌ 范围内线性关系良好（ｒ＝０．９９９ ９），平均回收率９９．９％（ｎ＝３），方 该法操作简便，专属性强，结果准确可靠，可有效控 法精密度ＲＳＤ＝０．６４％；有关物质各杂质峰与主峰之间的分离良好。结论制药品质量。 关键词：ＨＰＬＣ；维胺酯胶囊；维胺酯；有关物质 Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｖｉａｍｉｎａｔｅ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｉｎ Ｖｉａｍｉｎａｔｅ ｃａｐｓｕｌｅｓ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｌ ＮＧ Ｊｕｎ （Ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’Ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＴｏｎｇｌｉｎｇ Ｃｉｔｙ，Ｔｏｎｇｌｉｎｇ，Ａｎｈｕｉ ２４４０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｖｉａｍｉｎａｔｅ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｉｎ Ｖｉａｍｉｎａｔｅ ｃａｐｓｕｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ ｔｘｍ）ｗａｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ＪＡＳＣＯ一１５００ ｗｉｔｈ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ ｍｅｔｈａｍｏｌ—ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ （１００：０．２）．Ｔｈｅ ｌｆｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ ０．７５ ｍｌ・ｍｉｎ～ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ３７０ｎｍ．Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ＡｕＦｓ ｗａｓ ０．０２．Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ２５℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｔ ｉｔｓ ｂｅｓｔ（ｒ＝０．９９９ ９）ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｒａｎｇｅ ｏｆ Ｖｉａｍｉｎａｔｅ ｉｎ ２．０～１２．０ ｍｇ・Ｌ～．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９９．９％（ｎ＝３），ａｎｄ ＲＳＤ ｗａｓ ０．６４％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｒａｐｉｄ，ｓｉｍｐｌｅ，ｅｘ— ｃｌｕｓｉｖｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ，ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｄｒｕｇ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ；ｖｉａｍｉｎａｔｅ ｃａｐｓｕｌｅｓ；ｖｉａｍｉｎａｔｅ；ｒｅｔｉｎａｍｉｄｏ—ｅｓｔｅｒ 维胺酯为维Ａ酸衍生物，具有调节和控制上皮细胞分化 长：经扫描，维胺酯最大检测波长为３７０ ｎｍ。在上述ＨＰＬＣ条 与生长，减少皮脂分泌，抑制角质形成细胞的角化过程，使角 件下，理论塔板数按维胺酯主峰计算不低于５ ０００，主峰同相 化异常恢复正常，抑制痤疮丙酸菌的生长，以及调节免疫和抗 邻峰的分离度为１．５６３，拖尾因子为１．２２。 炎作用。口服用于治疗中、重度痤疮，对鱼鳞病、银屑病、苔藓 ２．２专属性试验未降解供试液色谱图：避光操作，精密称 类皮肤病及角化异常性皮肤病也有一定的疗效。本文参考文 取供试品适量（约相当于维胺酯５ ｍｇ），置１０ ｍｌ量瓶中，加无 献 。 采用ＨＰＬＣ法测定维胺酯胶囊中维胺酯的含量及其有 水乙醇１０ ｍｌ超声解溶，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续 关物质。实验结果表明，本方法操作简便，专属性强，结果准 滤液１０ ｌ，按上述方法进行试验，记录色谱图，作为降解试验 确可靠，可有效控制药品质量。 对照谱图，见图１。从色谱图可以看出，主峰保留时间为 １ 仪器与试药 １０．６１５ ｍｉｎ（维胺酯），主杂质为９．７９８ ｍｉｎ。分离度为１．５３６、 ＪＡＳＣＯ－１５００系列高效液相色谱仪（日本岛津公司），包括 理论板数７ ９６２、拖尾因子１．１２８。 ＰＵ一１５８０型输液泵和ｕＶ－１５７５型紫外检测器，ＣＫＣｈｒｏｍＴ 色谱 空白辅料对试验的影响：按处方，称取除维胺酯外其他成 工作站６．１版软件；天津奥特赛恩斯ＡＴ一３３０型柱温箱；瑞士 分适量，加无水乙醇制成供试液，按上述方法进行试验，记录色 梅特勒ＡＥ－２４０电子天平（０．Ｏ１ ｍｇ；Ｏ．１ ｍｇ）；维胺酯对照品 谱图，见图１，从色谱图可以看出空白辅料对试验结果无影响。 （重庆华邦制药股份有限公司提供）；维胺酯胶囊（重庆华邦 通过高温降解试验、碱降解试验、酸降解试验、氧化破坏 制药股份有限公司，批号２００６０４０２，２００６０６１２，２００６０７２１，）所 试验及光破坏试验知维胺酯胶囊对光、热、酸、碱、氧化均不稳 用乙腈、甲醇为色谱纯，水为亚沸蒸馏水，其他试剂均为分析 定，均可产生新杂质。但在上述试验条件下，主峰与各产物杂 纯。 质峰间有较好的分离效果，表明此方法专属性强。 ２方法与结果 ２．３线形关系及最低检出限试验精密称取维胺酯对照品 ２．１系统适用性参考文献…，选择ＨＰＬＣ条件为：色谱柱 约２５ ｍｇ，精密称定，置５０ ｍ１量瓶中，加无水乙醇超声解溶并 为Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃｌ８柱（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ Ｉｘｍ），以十八烷基硅烷 定容，摇匀，滤过，取续滤液作为对照品储备液。精取对照品 键合硅胶为填充剂，柱温为２５％；以甲醇一醋酸（１００：０．２）为流 储备液适量，用无水乙醇稀释配制成１０～１００ ｍｇ・Ｌ 的系 动相，流速选择为０．７５ ｍｌ・ｍｉｎ～；进样量为１０ ｌ。检测波 列溶液，备用。按上述色谱条件分别取空白样品及各不同浓 ［４］ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ ３０一Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ２５［ｓ］，２００７： ［Ｍ］．北京：中国卫生出版社，２０１０：１１０． １２３８． （收稿日期：２０１１—０４—２５） ［５］周国斌．中国药品检验标准操作规程——药品质量管理规范 安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０１２ Ｊａｎ；１６（１） ・４３・ 度溶液１Ｏ ｌ进样，进行测定，记录色谱图及峰面积。结果表 ２．４精密度及稳定性试验精密称取维胺酯胶囊内容物６ 明维胺酯在２．０—１２．０ ｍｇ・Ｌ 范围内其浓度与峰面积间有 份（每份约相当于维胺酯５ ｍｇ），按含量测定项下配置，在上 良好的线形关系，回归方程为Ａ＝２．０６５×１０ Ｃ＋１．０１７×１０ 。 述色谱条件下分别进行测定，记录峰面积并计算。平均含量 本品的最低检出限为０．１０ ｎｇ。 为９９．７２％，ＲＳＤ为０．７１％（ｎ＝６）。 ０ ４ ８ １２ ｌ６ ２Ｏ ２４／ｍｉｎ ０ ４ ８ １２ １６ ２０ ２４／ｍｉｎ 对照品 样品 空白辅料 图１高效液相色谱图 精密称取同一批号的维胺酯胶囊内容物０．３ ｇ，加无水乙 质除峰１变化较大，其他杂质峰面积的ＲＳＤ均小于５．０％；两 醇溶解并稀释至１００ ｍｌ，０．４５ ｍ微孔滤膜过滤，备用。取滤 主峰面积的ＲＳＤ均小于０．５％，表明本试验仪器精密度良好。 液１０ １，进样，记录色谱图；并于２，４、８、１２、２４ ｈ重复进样１ 试验结果表明，本品供试液在避光时稳定性良好，可以在 次，共６次，考察样品的稳定情况，测定结果见表１。结果表 ２４ ｈ内使用。 明，供试液在避光时２４ ｈ内无降解产物产生，本品的有关物 表１维胺酯胶囊稳定性试验结果 ２．５加样回收率试验取已知标示量的供试品适量，分别加 上述色谱条件下进样，测定，记录色谱图及峰面积。平均含量 入一定量的维胺酯对照品，按供试品溶液制备方法制备，在上 为９９．６５％，ＲＳＤ为０．８２％（ｎ＝３），结果见表３。 述色谱条件下测定，平均回收率为９９．９％，ＲＳＤ为０．６４％（ｎ ２．７有关物质的测定精密称取供试品适量（约相当于维 ＝９），结果见表２。结果表明主药回收完全，辅料对测定无干 胺酯５ ｍｇ），置１０ ｍｌ量瓶中，加无水乙醇１０ ｍｌ超声溶解，加 扰，实验方法可靠。 无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试液。取供试 表２回收率试验（ｎ＝３） 液０．２ ｍｌ，置１０ ｍｌ量瓶中，加流动相稀释至刻度（１．０ ｍｇ・ Ｌ ），摇匀，作为预试液。 流动相为甲醇一ＨＡｃ（１００：０．２）；流速为０．７５ ｍｌ・ｍｉｎ～； 检测波长为３７０ ｎｍ；柱温为２５℃。 量取预试液１０ ｌ注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使 主成分色谱峰的峰高为满量程的１５％左右；再取供试液１０ ｌ，注入液相色谱仪，记录色谱图至维胺酯主峰保留时间的３ 倍。 表３维胺酯胶囊含量及有关物质测定结果（ｎ：３） ２．６含量测定 分别精密称取批号为２００９０４０２，２００９０６１２， ２００９０７２１的维胺酯胶囊适量（约相当于维胺酯５ ｍｇ），加无水 按上述试验方法对三批样品进行检验。结果见表３。三 乙醇溶解并稀释至１０ ｍｌ，０．４５ ｍ微孔滤膜过滤，备用。在 批样品的有关物质均小于８％。 ・４４・ 安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０１２ Ｊａｎ；１６（１） 果糖二磷酸钠片含量测定方法研究 金兴成，刘丽萍 （安徽医科大学第二附属医院药剂科，安徽合肥２３０６０１） 摘要：目的 建立果糖二磷酸钠片含量测定方法。方法 采用酶法测定含量，通过使用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 （ＮＡＤＨ）、３．磷酸甘油脱氢酶一磷酸丙糖异构酶（ＧＤＨ—ＴＩＭ）、醛缩酶（ＡＬＤ）催化果糖二磷酸钠降解，在３４０ ｎｍ波长处测定其吸 收度。结果果糖二磷酸钠在０—４００ ｍｇ－Ｌ 范围内呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９ ５），平均回收率为９９．０４％（ＲＳＤ＝ ０．５７％，ｎ：９）。结论该方法灵敏、准确，重复性好，能满足果糖二磷酸钠片含量测定的要求。 关键词：果糖二磷酸钠片；含量测定；ｐＨ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｕｃｔｏｓｅ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｉｕｍ ｔａｂｌｅｔｓ ＪＩＮ Ｘｉｎｇ－ｃｈｅｎｇ，ＬＩＵ Ｌｉ—ｐｉｎｇ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏ￣ｉｔａｌ ｆｏＡｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｆｅｉ，Ａｎｈｕｉ ２３０６０１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｕｃｔｏｓｅ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｉｕｍ ｔａｂｌｅｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＦＤＰ—Ｎａ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｍｅｔｈｏｄ．Ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｒｅｄｕｃｅｄ ｎｉａｃｉｎａｍｉｄｅ ａｄｅｎｉｎｅ ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｅｄ（ＮＡＤＨ）、ｇｌｙｃｅｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｅｈｙ— ｄｒｏｇｅｎａｓｅ—ｔｒｉｏｓｅｐｈ０ｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＧＤＨ—ＴＩＭ）ａｎｄ ａｌｄｏｌａｓｅ（ＡＬＤ）ｔｏ ｃａｔａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ＦＤＰ—Ｎａ，ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ａｔ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ３４０ ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅｓ ｗａｓ ｌｉｎｅａｒ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０～４００ ｍｇ・Ｌ～ｆｏｒ ｆｒｕｃｔｏｓｅ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｉｕｍ ｔａｂ— ｌｅｔｓ（ｒ＝０．９９９ ５）．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９９．０４％（ＲＳＤ＝０．５７％，ｎ＝９）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｃ— ｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ．Ｉｔ ｃａｎ ｓａｔｉｓｆｙ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｕｃｔｏｓｅ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｉｕｍ ｔａｂｌｅｔｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｆｒｕｃｔｏｓｅ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｉｕｍ ｔａｂｌｅｔｓ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｐＨ 果糖二磷酸钠（ＦＤＰ．Ｎａ）具有恢复和改善细胞功能，在新 自制，２５０ ｍｇ・片 ）；还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 血管等疾病的治疗中有较显著的疗效，且有利于大脑皮层神 （ＮＡＤＨ）为上海源聚生物科技有限公司产品；３－磷酸甘油脱 经细胞的生长发育 。其片剂现已被国家药品监督管理局 氢酶一磷酸丙糖异构酶混悬液（ＧＤＨ—ＴＩＭ）、醛缩酶（ＡＬＤ）均 批准用于心肌缺血、心肌梗死等疾病的治疗和辅助治疗。按 为Ｓｉｇｍａ公司产品；其他试剂均为分析纯。 其制备工艺，成品中可能含有果糖 ６－磷酸果糖和６一磷酸葡 ２方法与结果 萄糖等杂质，为考察果糖二磷酸钠（ＦＤＰ．Ｎａ）片剂的含量，本 ２．１对照品溶液的制备精密称取经真空冷冻干燥至恒重 文采用酶法研究其含量测定的方法，取得较满意的结果，现报 的果糖二磷酸钠对照品适量，加纯化水溶解，并加０．５ ｍｏｌ・ 道如下。 ｍｌ‘。氢氧化钠溶液使ｐＨ值为５．５～６．３，定量制成每１ ｍｌ中 １仪器与试剂 含果糖二磷酸钠０．３ ｍｇ的溶液。 ＴＵ一１８１０紫外可见分光光度计（北京普析通用有限公 ２．２供试品溶液的制备取本品１０片，研成细粉，精密称取 司）；果糖二磷酸钠（中国药品生物制品检定所，纯度： 细粉适量，约相当于果糖二磷酸钠０．３ ｇ，置１００ ｍｌ量瓶中， ９９．１％）；果糖二磷酸钠片（批号１００２２０、１００２２８、１００３１３， 加少量的纯化水溶解，加０．５ ｍｏｌ・ｍｌ 氢氧化钠溶液２ ｍｌ， ３讨论 在流动相的筛选上，我们分别考察了甲醇、９０％甲醇、甲 参考文献： 醇．三乙胺（１００：０．２）、甲醇一醋酸（１００：０．２）作为流动相时，维 ［１］曾令高，龚士学，曾晓莉，等．ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定维胺酯乳膏中维 胺酯与杂质的分离效果。其中以甲醇、９０％甲醇为流动相时，胺酯的含量［Ｊ］．药物分析杂志，２００５，２５（５）：５８５—６． 维胺酯与杂质无法分离；三乙胺对本品杂质分离也无影响 ［２］欧阳净，黄华，杨成钢，等・三蕊胶囊中维胺酯含量测定方法 （分离度为１．２５６）；只有醋酸对本品杂质分离有促进作用（分 的改进［Ｊ］ｌ现代食品与药品杂志，２００６，１ （ ）：２３—５・ 离度为１．６） ［３］ 何作民，何文斌，高卫东・高效液相色谱法测定维胺酯有关物质 ～ 。实验中对流速，分别考察了均速１．０ ｍ１．ｍｉｎ～、０．７５ 中维胺酯的含量［ ］・药学学报，２０１０，２６（ ）： ｍｌ‘ｍｉｎ－１及 １・０ ｍｌ‘ｍｉｎ ），其他条件不变。结果在均速０・７５．（学主峰前０：７５ ｍ．１‘竺ｉｎ一，主峰后 ［ ｍｌ’ ４ ３陆广武，可待因含量［Ｊ］袁杰，洪田谷．ＨＰＬｃ法测定枇杷止咳胶囊中的磷酸 ．安徽医药，２０１０，１４（１１）：１２８２—３． ｍｉｎ 时，杂质峰与主峰分离度最好，其他各项指标也符合实 ［５］ 田磊ＨＰＬＣ法同时测定复方银翘氨敏胶囊中维生素Ｃ及对 验要求。 乙酰氨基酚的含量［Ｊ］．安徽医药，２０１０，１４（９）：１０２６—７． 由于维胺酯易受空气及紫外线的氧化而颜色变深，所以 （收稿日期：２０１１—０１—１７） 实验操作时应使用棕色瓶，并注意避光操作，以免影响含量测 定结果的准确度。
