多糖的提取和纯化

Revised by Liu Jing on January 12, 2021

多糖的提取和纯化

多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化摘要本文较详细地介绍了多糖的提 取和纯化方法，为多糖的研究和生产提供参考依据。关键词 多糖；提取；纯 化；活性炭多糖（polysacharides, PS）,又称多聚糖，是由10个以上的单糖 通过昔键连接而成的，具有广泛生物活性的天然大分子化合物。它广泛分布于自 然界高等植物、藻类、微生物（细菌和真菌）与动物体内。20世纪60年代以 来，人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能［1］： （1）多糖可作 为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症 等免疫系统疾病，我至能抗AIDS病毒［2］。如甘草多糖具有明显的抗病毒和抗肿 瘤作用［10］,黑木耳多糖、银杏外种皮多糖和芦荟多糖可抗肿瘤和增强人体免疫 功能［3-5］ o （2）多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸 与蛋白质的生物合成作用。如柴胡多糖具有抗辐射，增强免疫功能等生物学作用 ［6］,麦冬多糖具有降血糖及免疫增强作用［7-8］,动物黏多糖具有抗凝血、降血 脂等功能［9］。（3）多糖能控制细胞和分化，调节细胞的生长与衰老。如爬山 虎多糖具有抗病毒和抗衰老作用［一粉碎一脱脂一粗提（2-3次）一吸滤或离心 一沉淀一洗涤一干燥首先除去表面脂肪。原料经粉碎后加入甲醇、乙醸、乙醇、 丙酮或1： 1的乙醇乙醸混合液，水浴加热搅拌或回流1 — 3小时，脱脂后过滤得 到的残渣一般用水作溶剂（也有用氢氧化钾碱性水液、氯化钠水液、1%醋酸和 1%苯酚或0. 1-1M氢氧化钠作为提取溶剂）提取多糖。温度控制在90-100°C, 搅拌4 — 6小时，反复提取2-3次。得到的多糖提取液大多较粘稠，可进行吸 滤。也可用离心法将不溶性杂质除去，将滤液或上清液混合（得到的多糖若为碱 性则需要中和）。然后浓缩，再加入2-5倍低级醇（甲醇或乙醇）沉淀多糖; 也可加入费林氏溶液或硫酸钱或溟化十六烷基三甲基镀

等，与多糖物质结合生成 不溶性络合物或盐类沉淀。然后依次用乙醇、丙酮和乙醍洗涤。将洗干后疏松的 多糖迅速转入装有五氧化二磷和氢氧化钠的真空干燥器中减压干燥（若沉淀的多 糖为胶状或具粘着性时，可直接冷冻干燥）。干燥后可得粉末状的粗多糖。1.2 微波辅助提取法：其原理为利用不同极性的介质对微波能的不同吸收程度，使基 体物质中的某些区域和萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使萃取物质从 基体或体系中分离出来，进入到介电常数小，微波吸收能力较差的萃取剂中 ［14］。由于微波能极大加速细胞壁的破裂，因而应用于中草药中有效成分的提取 能极大加快提取速度，增加提取产率。而且由于其选择性好，提取后基体能保持 良好的性状，提取液也较一般的提取方法澄清［15］ o聂金源等在柴胡多糖和黄酮 化合物的提取［18］中对微波辅助提取法、超声辅助法和索氏提取法进行比较，发 现微波辅助提取法所需时间最短（lOmin）,多糖的提取率最高（28.46%）。 1.3超声辅助法：其原理是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提 取，另外超声波的次级效应，如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能 加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合，利于提取［16］ o超声波辅助法与 常规提取法相比，具有提取时间短、产率高、无需加热等优点［17］ o 1. 4索氏提 取法：将植物粉末置于索氏提取器中，加入石油醸，60°C-90°C条件下提取至无 色（一般为6小时）。过滤，滤渣挥发干燥完溶媒后加入80%乙醇，再提取6小 时，过滤，滤渣乙醇挥发干燥后加蒸僻水。回流提取2次，趁热过滤，滤液减压 浓缩，再除蛋白，醇沉，除色素。60°C干燥，称重。1.5醇提法：先后将90%和 50%乙醇加入植物粉末中，振荡充分再抽滤。滤液中加入足量无水乙醇，至于4°C 冰箱中过夜。减压抽滤，再除去色素，得多糖粗品，在6O°C°C°C1