一、材料与方式： 材料 蚕豆（山西太原）经查验未受污染，卡诺氏液、乙醇、醋酸、盐酸、Giemsa染液，皆为分析纯，市场上购买的立白洗洁精。 方式 预处置 选取新鲜、饱满、大小均匀的蚕豆种子，放入盛有自来水的脸盆中，在室温下浸泡24h,使其充分吸胀。将其吸胀的种子放于铺有纱布的脸盆中，再盖几层纱布，并始终维持纱布湿润但不浸没种子的状态。在室温下培育2d左右，在大部份初生根长至2cm左右时进行实验。 诱变 选取四十根生长良好、根长一致的初生根，平均分为两组。 处置组：用洗洁精处置后的初生根培育1d后，用自来水清洗3次，然后在自来水中恢复培育1d。 对照组：用自来水处置为对照组，用一样方式培育。 固定 将对照组和处置组别离剪下1cm左右根尖，用卡诺氏固定液固定1d. 解离 将放于乙醇中的根尖别离掏出，用蒸馏水冲洗3次左右，放入经预热的L HCl溶液中，在60℃恒温下解离15min左右，再用蒸馏水漂洗3次左右。 染色 将上述用蒸馏水漂洗过的根尖放于培育皿中，用Giemsa染液染色20分钟左右。根尖用漂洗液漂洗几回。 制片 将漂洗过的根尖置于载玻片上，用镊子捣碎后涂片，使材料分散均匀，让其自然风干。 镜检 选取视野清楚、分散均匀的细胞进行显微观看，统计微核细胞数。每一个根尖统计约1000个细胞。 数据统计与分析 对镜检所得数据进行分析，统计微核细胞千分率。 数据处置 微核细胞千分率/‰= (样品检出的微核细胞数/样品检查的细胞数) ×1000‰ ； 污染指数=样品实测微核细胞率/对照组微核细胞率。 污染指数：为无污染；为轻度污染；为中度污染；以上为重度污染。 二、结果与分析： 立白洗洁精对蚕豆根尖微核细胞率的阻碍 表1 立白洗洁精对蚕豆根尖微核细胞率的阻碍 组别 1 2 3 4 5 6 7 8
立白洗洁精的污染指数 表2 立白洗洁精的污染指数 采样地点 对照组 1 2 3 4 5 6 7 8
微核细胞率
/%
污染指数
污染等级 重污染 中污染 重污染 重污染 中污染 重污染 重污染 重污染
浓度（mol/L)
细胞数 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000
微核细胞数 85 72 83 94 73 99 77 81
微核细胞率/%
经立白洗洁精处置后，蚕豆根尖细胞的微核率与对照组相较明显增加。同时经上表数据分析，在日常生活中，该洗洁精的污染品级均为中度污染以上。 讨论： 蚕豆染色体大二少，它的根尖分生组织细胞增殖周期短，一样为8-48h，其中大部份时刻又是对诱变剂灵敏间期。蚕豆根尖细胞受到有害理化因子解决时，其细胞染色体的正常互换即受阻碍，乃至发生断裂，产生染色体片段，这些染色体片段可能发生畸变，并散布在主核的周围形成微核。本实验结果说明：可能改变蚕豆根尖细胞细胞膜的通透性，使具有诱变活性的有毒物质进入细胞，使微核率升高产生必然的诱变性效应。由此看来，合成洗洁精作为一种有机污染物，通过各类途径污染水源、贮存在水果、蔬菜、食物器皿中，给人们带来潜在危险性，应予引发重视，其对人体细胞的诱变性有待进一步研究。 参考文献： 1、曹佳、林真、余争平，微核实验——原理、方式及其在人群检测和毒性评判中的应用[M]，北京：军事医学科学出版社，2000；1-9。 2、Read Biology of Vicia Faba in Relation to the General Problem[M].London：Black Well Press，1959；61-59。 3、臧宇，蚕豆根尖微核实验的应用与进展[J]，癌变.畸变.突变，(3)：158-160。 4、张凡;[D];厦门大学;2020年。 5、刘学伟等。洗涤灵对蚕豆根尖细胞的遗传毒性[J]。环境与健康杂志，2020。 6、王虹等。洗涤剂对蚕豆根尖细胞致畸形效应的研究。《中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议论文集》。2020年
