各种缓冲液的配制方法-(总7页)
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各种缓冲液的配制方法 Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液
PH LNa2HPO4 (ml) L柠檬酸钠 (ml) PH LNa2HPO4 (ml) L柠檬酸钠 (ml) Na2HPO4。2H2O，分子量= L溶液含L 柠檬酸. H2O，分子量= L溶液含L PH L柠檬酸 （ml） 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（L） L柠檬酸 PH L柠檬酸 钠（ml） （ml） L柠檬酸钠 (ml) 柠檬酸. H2O，分子量= L溶液含L 柠檬酸钠. 2H2O，分子量=；L溶液含 g/L
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PH LNaAC(ml) 醋酸缓冲液（L，18℃） LHAC(ml) PH LNaAC(ml) LHAC(ml) H2O,分子量= L溶液含L
（1）醋酸盐溶液的配制： 醋酸－醋酸钠缓冲液
取醋酸钠,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液
取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液
取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液,再加水稀释至1000ml，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液
取醋酸钠18g,加冰醋酸,再加水稀释至1000ml,即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液
取醋酸钠,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液 取醋酸钠，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
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用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=*10-5（乘10的-5次方），PKa=-lgKa=，将PH=代入，可得C(NaAc)/C(HAc)= 通常我们配制时会使C(HAc)=L，或是C(HAc)=L等。若是配制C(HAc)=L，则C(NaAc)=L 称量醋酸钠固体质量为82*=46克 量取冰醋酸体积为*1000/=。 将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。 当然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。
PH 苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液 LNaOH(ml) L苯二甲酸氢钾（ml） 加水至(ml) L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾溶于水中，稀释至500ml。 PH 5．8 LNa2HPO4 (ml) 磷酸缓冲液（L） LNaH2PO4 (ml) PH LNa2HPO4 (ml) LNaH2PO4 (ml) 4
Na2HPO4 .2 H2O ,分子量=， L溶液含L NaH2PO4 . 2 H2O ,分子量=， L溶液含L NaH2PO4 . H2O,分子量=， L溶液含L Na2HPO4 .12 H2O,,分子量=， L溶液含L
磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法
PBS
PBS (135 mM NaCl, mM KCl, mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH PBS缓冲液（～）：NaCl 137mmol/L，KCl L，Na2HPO4 L， KH2PO4 L
称 NaCl， KCl， KH2PO4(or Na2HPO4)和 K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是，通常所说的浓度 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。 母液的配制：
Na2HPO4：称取 Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水 NaH2PO4：称取 NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水 各种浓度PB(pH=的配制：
先配 PB (pH=，100ml)：取19ml L的 NaH2PO4， 81ml L 的 Na2HPO4, 即可。 然后 只需将 PB (pH=按相应比例适当稀释 即可，如： PB（PH=） ：取 500ml PB，加水稀释至 1000ml 即可。
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PB （PH=）：取50ml PB，加水稀释至 1000ml 即可。 PB （PH=）：取100ml M PB，加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCl的话，加入 NaCl 至%（g/100ml）即可。 另：其它各种另 PH值的 PB（100ml)配方 ： pH NaH2PO4（ml） Na2HPO4（ml）
92 8 90 10
85 15
51 49 45 55 38 62 33 67 28 72 23 77 19ml 81ml 16 84 13 87
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磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法
称取8g NaCl、 KCl、 Na2HPO4和 KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至，最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是，通常所说的浓度 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。 PH
H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl Na2HPO4 NaH2PO4
根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。
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PBS缓冲液
称取NaCl 8g，KCl ，Na2HPO412H2O , KH2PO4 ，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至，加水定容至1L，常温保存备用。 PBST缓冲液
取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中，混匀后即刻使用。现用现配。 如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。
十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~
的PBS配方详细
1. NaCl 137mmol/L，KCl L，Na2HPO4 L， KH2PO4 L
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加浓盐酸将pH值调节至，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和 mM MgCl2。
L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：
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甲液：L Na2HPO4溶液 ：称取磷酸氢二钠 ,加蒸 馏水至1000ml ; 乙液：L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, ,加蒸馏水至1000m1。
将甲乙液分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表:
pH 甲液ml 乙液mI
你要配制pH=的PBS，可用甲、乙液各50ml混合即可。 PH L硼砂（ml） 硼酸缓冲液（L硼酸盐） L硼酸（ml） PH L硼砂（ml） L硼酸 （ml） 硼砂,分子量=,L溶液=L硼砂含L 硼酸，分子量=,L溶液含L
硼砂易失去结晶水，必须在带塞得瓶中保存；硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液代替 PH LHCl(ml) LKCl(ml) 盐酸-氯化钾缓冲液 加PH LHCl(ml) LKCl(ml) 加水9
水至(ml) 100 100 100 100 100 100 至（ml） 100 100 100 100 100 100 LKCl溶液：溶氯化钾于水中，稀释至500ml PH LHCl (ml) 苯二甲酸氢钾-盐酸缓冲液 L苯二甲酸氢加PH LHCl (ml) 钾（ml） 水至（mi） 10 0 10 0 10 0 10 0 10 0 L苯二甲酸氢钾（ml） 加水至（mi） 100 100 100 100 L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时额苯二甲酸氢钾溶于水中，稀释至500ml PH LNaOH 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液 L磷酸二氢钾加PH LNaOH L磷酸二氢钾加水10
(ml) (ml) 25．00 水至（ml） 100 100 100 100 100 100 (ml) (ml) 至（ml） 100 100 100 100 100 100 L磷酸二氢钾溶液：溶磷酸二氢钾于水中，稀释至500ml PH LNaOH(ml) 硼酸-氯化钾-氢氧化钠缓冲液 L硼酸-氯化钾加PH LNaOH(ml) （ml） 水至（ml） 10 0 10 0 10 0 10 0 10 0 10 0 L硼酸-氯化钾（ml） 加水至（ml） 100 100 100 100 100 100 L硼酸-氯化钾溶液：溶硼酸和氯化钾于水中稀释至500ml
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